Diferans ki genyen ant mikwoskòp lazè konfokal ak mikwoskòp tradisyonèl optik
Lazè Scanning Confocal Fluorescence Microscopy se yon enstriman analiz molekilè ak selil byoloji relativman avanse ki sèvi ak òdinatè, lazè ak teknoloji pwosesis imaj pou jwenn done ki genyen twa dimansyon nan echantiyon byolojik. Li se sitou itilize yo obsève estrikti nan selil k ap viv ak chanjman yo byolojik nan molekil espesifik ak iyon, analiz quantitative, ak an tan reyèl detèminasyon quantitative.
Prensip lazè mikwoskòp konfokal: sèvi ak pinhole ekleraj la mete dèyè sous limyè a ak pinhole deteksyon an mete devan detektè a pou reyalize pwen lumières ak deteksyon pwen. Limyè ki emèt nan sous limyè a atravè pinhole ekleraj la konsantre sou yon pwen sou plan fokal echantiyon an, epi fliyoresans ki emèt nan pwen sa a imajine sou pinhole deteksyon an, epi nenpòt limyè ki emèt deyò pwen sa a bloke pa deteksyon an. pinhole. Pinhole ekleraj la ak pinhole deteksyon an konjige nan pwen an iradyasyon oswa pwen an detekte, kidonk pwen an detekte se pwen an konfokal, ak avyon an kote pwen an detekte sitiye se avyon an konfokal.
Òdinatè a montre pwen yo detekte sou ekran òdinatè a nan fòm pwen imaj. Yo nan lòd yo jenere yon imaj konplè, sistèm optik la nan chemen optik la analize sou plan fokal echantiyon an pou jenere yon imaj konfokal konplè. Osi lontan ke etap la deplase monte ak desann sou aks Z la, yon nouvo kouch echantiyon an deplase nan plan konfokal la, epi yo imajine nouvo kouch echantiyon an sou monitè a. Avèk mouvman kontinyèl nan aks Z, imaj kontinyèl nan diferan kouch echantiyon an ka jwenn. Limyè koupe imaj.
Diferans ki genyen ant mikwoskòp limyè tradisyonèl yo
Mikwoskòp fliyoresan tradisyonèl yo gen yon enpèfeksyon enfranchisabl: estrikti fliyoresan yo deyò plan fokal la twoub ak twoub. Rezon ki fè la se ke pifò espesimèn byolojik gen estrikti sipèpoze. Si estrikti ki gen etikèt fliyoresan yo distribye nan diferan nivo ak sipèpoze, fliyoresans gaye ki soti anwo oswa anba plan fokal la resevwa tou pa lantiy objektif la, epi rezolisyon mikwoskòp fliyoresan an pral amelyore anpil. diminye.
Sou baz mikwoskòp optik tradisyonèl yo, mikwoskòp konfokal optik lazè sèvi ak limyè lazè kòm sous limyè, adopte prensip ak aparèy konjige konsantre, epi sèvi ak òdinatè pou fè pwosesis imaj dijital, obsèvasyon, analiz ak pwodiksyon objè yo obsève. Echantiyon an ka analize tomografikman ak imaj pou obsèvasyon ki pa destriktif ak analiz estrikti espasyal ki genyen twa dimansyon nan selil yo. An menm tan an, lè l sèvi avèk etikèt imunofluoresan ak sond etikèt fluorescent ion, teknoloji sa a ka pa sèlman obsève selil fiks ak seksyon tisi, men tou, fè obsèvasyon dinamik an tan reyèl ak deteksyon nan estrikti a, molekil, iyon ak aktivite lavi nan selil k ap viv, nan nivo subselilè Obsève siyal fizyolojik tankou Ca2 plus , valè pH, potansyèl manbràn ak chanjman nan mòfoloji selilè, te vin tounen yon nouvo jenerasyon zouti rechèch pwisan nan domèn mòfoloji, byoloji selil molekilè, nerosyans, farmakoloji, ak jenetik.
