Plizyè mikwoskòp optik espesyal ak diferans yo
1 mikwoskòp jaden nwa
Mikwoskòp jaden nwa a pa gen fonksyon pou obsève estrikti amann andedan objè a, men li ka distenge egzistans ak mouvman patikil ki pi wo a 0.004 μm. Se poutèt sa, li souvan itilize yo obsève estrikti nan selil k ap viv ak mouvman an nan patikil entraselilè.
Prensip debaz mikwoskopi jaden nwa se efè Tyndall. Lè yon gwo bout bwa limyè pase nan yon chanm nwa, yon "chemen" pousyè klere nan lè a ka obsève nan yon direksyon pèpandikilè ak limyè ensidan an. Fenomèn sa a se efè Tyndall.
Apre yo fin ranplase mikwoskòp jaden nwa a ak yon kondansasyon jaden nwa sou yon mikwoskòp optik òdinè, akòz oklizyon estrikti parabolik entèn nan kondansasyon an, limyè a iradyasyon sou sifas objè a yo dwe enspekte pa ka dirèkteman antre nan lantiy objektif la ak oculaire, ak sèlman gaye limyè ka pase nan, se konsa jaden an de vi se nwa.
Itilizasyon debaz mikwoskopi fon nwa se jan sa a:
1. Enstale yon kondansasyon jaden nwa (oswa itilize yon papye nwa epè pou fè yon plak pwotèj limyè epi mete l anba kondansasyon yon mikwoskòp òdinè pou jwenn efè jaden nwa).
2. Chwazi yon sous limyè fò, anjeneral ak yon limyè mikwoskòp pou anpeche limyè dirèk antre nan lantiy objektif la.
3. Ajoute yon gout nan lwil oliv bwa sèd ant kondansasyon an ak glise an vè pou fè pou evite refleksyon total nan limyè a limine sou kondansasyon an, li pa rive jwenn objè a yo dwe enspekte ak limyè jaden nwa.
4. Fè ajisteman sant, se sa ki, deplase kondansasyon an orizontal pou aks optik kondansasyon an ak aks optik mikwoskòp la entèdi sou yon liy dwat. Leve epi bese kondansasyon an, aliman pwen fokal kondansasyon an (apex gwo bout bwa konik la nan Figi 1-2) ak objè yo dwe teste a.
5. Chwazi lantiy objektif ki koresponn ak kondansasyon an, ajiste longè fokal la, epi opere dapre metòd mikwoskòp òdinè.
Estereomikwoskòp
Mikwoskòp estereyo, ke yo rele tou mikwoskòp solid oswa miwa diseksyon, imajine yon imaj espas dwat ki genyen twa dimansyon, epi yo gen karakteristik efè stereoskopik fò, klè ak lajè D, distans k ap travay long (anjeneral 110mm) ak gade agrandisman kontinyèl. Souvan yo itilize nan byoloji pou obsèvasyon an tan reyèl pandan disseksyon
Sous limyè yon mikwoskòp optik òdinè se limyè paralèl, kidonk li fòme yon imaj avyon ki genyen de dimansyon; pandan ke yon mikwoskòp stereo adopte yon chemen optik doub-chanèl, ak travès yo gòch ak dwa nan tib la binokilè gen yon sèten ang de vi (jeneralman 12o15o), kidonk li ka Yon imaj stereoskopik nan espas ki genyen twa dimansyon fòme.
Mikwoskòp Stereo yo itilize nan yon fason ki sanble ak mikwoskòp limyè òdinè, men yo pi pratik. Diferans prensipal ant de la se:
1. Objè enspeksyon yo nan mikwoskòp stereo pa bezwen fè nan glisad.
2. Etap la nan mikwoskòp la stereo se dirèkteman fiks sou baz la glas, epi li ekipe ak nwa ak blan panno doub-sided oswa panno vè, ak operatè a ka chwazi dapre objè a ak kondisyon nan enspeksyon an mikwoskòp.
3. D' mikwoskòp stéréo a dwat, ki se pratik pou operasyon dissection.
4. Mikwoskòp stereo a gen yon sèl lantiy objektif, epi li ka kontinyèlman ajiste pa wotasyon vis ajisteman an.
mikwoskòp fliyoresan
Mikwoskopi fluoresans se yon zouti optik pou rechèch kalitatif ak quantitative sou entansite fliyoresans ki emèt pa sibstans entraselilè.
Gen de kalite sibstans fliyoresan nan selil yo, yon moun ka fliyoresan dirèkteman apre yo fin iradyasyon pa reyon iltravyolèt, tankou klowofil, elatriye; lòt sibstans pa gen pwopriyete sa a, men si yo tache ak koloran fliyoresan espesifik oswa antikò fliyoresan, yo ka fliyoresan pa reyon iltravyolèt. Kapab tou fluorescent apre iradyasyon
Byoluminesans mikwoskòp mache dwat / Envèse mikwoskòp bioluminesans
Prensip la nan mikwoskòp fluoresans se sèvi ak yon sous limyè pwen ki gen gwo efikasite lumineux (tankou ultra-wo presyon mèki lanp) emèt limyè nan yon longèdonn sèten (tankou limyè iltravyolèt 3650λ oswa limyè koulè wouj violèt-ble 4200λ) atravè sistèm nan filtre. kòm limyè eksitasyon eksite sibstans fliyoresan nan echantiyon an. Apre fliyoresans nan divès koulè emèt, li filtre pa bloke (oswa siprime) filtre dèyè lantiy objektif la, ak Lè sa a, obsève nan agrandisman nan oculaire a.
Filtè a bloke gen de fonksyon: youn se absòbe ak bloke limyè eksitasyon an soti nan k ap antre nan oculaire a pou yo pa deranje fluoresans la ak domaje je yo; lòt la se chwazi epi kite yon fliyoresan espesifik pase nan, ki montre yon koulè fliyoresan espesifik.
Mikwoskòp fliyoresan yo ka divize an de kalite dapre prensip chemen optik la:
1. Transmisyon Fluoresan Mikwoskopi
Nan pi gran mikwoskòp fluoresans, sous limyè eksitasyon an pase nan materyèl echantiyon an atravè yon kondansasyon pou eksite fluoresans. Avantaj la se ke fliyoresans la fò nan agrandisman ki ba, men dezavantaj la se ke fliyoresans la diminye ak ogmantasyon nan agrandisman. Se konsa, li se sèlman apwopriye pou obsève pi gwo materyèl echantiyon.
2. Epi-fluoresan Mikwoskopi
Limyè eksitasyon an tonbe soti nan lantiy objektif la desann nan sifas echantiyon an, se sa ki se menm lantiy objektif la itilize kòm kondansasyon ekleraj la ak lantiy objektif pou kolekte fliyoresans.
Yon splitter gwo bout bwa dichroic (glas dichroic) bezwen ajoute nan chemen an optik, ki fòme yon ang 45o ak aks optik la. Limyè eksitasyon an reflete nan lantiy objektif la epi kolekte sou echantiyon an. Limyè eksitasyon an ki reflete nan sifas glise a antre nan lantiy objektif la an menm tan an, retounen nan splitter gwo bout bwa de-koulè, separe limyè eksitasyon an soti nan fliyoresans, ak limyè eksitasyon ki rete a absòbe filtè bloke a. Si ou chanje nan yon konbinezon de diferan filtè eksitasyon / splitters gwo bout bwa de koulè / bloke filtè, bezwen diferan pwodwi reyaksyon fliyoresan ka satisfè.
Avantaj ki genyen nan sa a kalite mikwoskòp fliyoresan se ke ekleraj la nan jaden an de vi se inifòm, D la se klè, ak pi gwo a agrandisman an, pi fò a fliyoresans la.
mikwoskòp kontras faz
Yon mikwoskòp kontras faz se yon mikwoskòp ki ka konvèti diferans faz (oswa diferans chemen optik) ki pwodui lè limyè pase nan yon objè nan yon chanjman nan anplitid (entansite limyè). Li se sitou itilize yo obsève selil k ap viv, seksyon tisi san tache oswa espesimèn tache ki manke kontras.
Je imen an ka sèlman idantifye chanjman nan longèdonn (koulè) ak anplitid limyè vizib, men se pa chanjman faz. Sepandan, pifò espesimèn byolojik yo trè transparan, ak anplitid vag limyè a fondamantalman chanje apre yo fin pase, epi sèlman faz la chanje.
Mikwoskòp kontras faz la fondamantalman chanje diferans nan chemen optik limyè vizib ki pase nan echantiyon an nan yon diferans anplitid, kidonk amelyore kontras ki genyen ant divès estrikti ak fè divès estrikti byen klè. Limyè a refrakte apre yo fin pase nan echantiyon an, devye nan chemen orijinal la optik, epi li retade pa 1/4λ (longè ond) an menm tan an. Si li ogmante oswa diminye pa 1/4λ, diferans nan chemen optik vin 1/2λ, ak de travès yo entèfere apre aks optik la Ranfòse, ogmante oswa diminye anplitid la, amelyore kontras la.
Estriktirèl, mikwoskòp kontras faz yo diferan de mikwoskòp optik òdinè nan sa:
1. Dyafram nan annulaire gen yon dyafram ak yon ouvèti bag, ki enstale ant sous limyè a ak kondansasyon an. Fonksyon an se fè limyè a pase nan kondansasyon an fòme yon kòn limyè kre epi konsantre sou echantiyon an.
2. Plak faz Mikwoskòp kontras faz la ajoute yon plak faz kouvwi ak fliyò mayezyòm andedan lantiy objektif la pou retade faz limyè dirèk oswa limyè difrakte pa 1/4λ. Gen de rejyon sou plak faz la, pati nan ki limyè dirèk pase yo rele "sifas konjige", ak pati nan kote limyè difrakte pase yo rele "sifas konpansasyon". Plak faz yo divize an de kalite dapre efè travay yo:
(1) Yon plak faz plis: limyè dirèk la reta pa 1/4λ, ak vag limyè yo sipèpoze apre de seri vag limyè yo konbine pou ogmante anplitid la, ak estrikti echantiyon an pi klere pase mwayen ki antoure a, ki fòme yon. kontras klere (oswa kontras negatif).
(2) B plis plak faz: Limyè difraksyon an reta pa 1/4λ, ak vag limyè de gwoup limyè yo soustraksyon apre aks la aliyen, epi anplitid la vin pi piti. Estrikti echantiyon an pi fonse pase mwayen ki antoure a, ki fòme yon kontras nwa (oswa kontras pozitif). Lantiy objektif la ak yon plak faz yo rele yon lantiy objektif kontras faz, ki souvan make ak "Ph" sou lojman lantiy objektif la.
