Pwopriyete optik nan mikwoskòp byolojik
Pèfòmans optik mikwoskòp la detèmine pa uit paramèt optik debaz sa yo (oswa paramèt):
(1) Ouverture nimerik
Ouverture nimerik yo rele tou rapò glas. Li refere a pwodwi a nan endèks la refraktif n nan mwayen ki genyen ant objè a obsève ak lantiy la ak valè a sinis nan mwatye nan ang la lantiy objektif. Sèvi ak NA oswa A. pou reprezante. NA=nsin( /2)
Sa yo rele ang bouch glas la refere a ang ki genyen ant reyon majinal pwen obsève k ap antre nan lantiy devan lantiy objektif la.
Ouverture nimerik la se yon paramèt enpòtan nan lantiy objektif la ak lantiy kondansasyon an, epi li se pre relasyon ak lòt paramèt optik nan mikwoskòp la. Li se jeneralman espere ke pi gwo a pi bon an. Li ka wè nan fòmil la ke gen de fason pou ogmante ouvèti nimerik la, youn se ogmante ang bouch glas la, ak lòt la se ogmante endèks refraktif ant lantiy objektif la ak echantiyon an.
Lè yo adopte metòd ansyen an, echantiyon an ak objè a ka kenbe pi pre ke posib. Men, kèlkeswa jan fèmen, se toujou mwens pase 180 degre. Kidonk, sin( /2) pi piti tou pase 1. Endèks refraktif lè a se n=1. Se poutèt sa, nimerik Ouverture nsin(/2) nan lantiy objektif sèk la toujou mwens pase 1, jeneralman ant 0.04 ak 0.95.
Lè yo adopte dènye metòd la, yo ka ajoute yon mwayen ki gen yon endèks refraktif ki pi wo ant lantiy objektif la ak echantiyon an. Pa egzanp, endèks refraktif lwil sèd la se n=1.515. Lè lwil oliv sèd yo itilize kòm mwayen an, Ouverture nimerik la ka rive jwenn plis pase 1.2. Se poutèt sa nan kèk ka lwil oliv linèt yo itilize. Kounye a, ouvèti maksimòm nimerik ke lantiy lwil oliv la ka reyalize se 1.4.
(2) Rezolisyon
Rezolisyon yo rele tou pousantaj diskriminasyon oswa pouvwa rezolisyon. Sa yo rele rezolisyon an refere a kapasite mikwoskòp la pou distenge estrikti amann objè a anba enspeksyon. Li se envès pwopòsyonèl ak distans rezolisyon an. Distans rezolisyon an refere a distans minimòm ant de pwen objè ki ka distenge. Pi piti distans rezolisyon an, se pi wo rezolisyon mikwoskòp la. Si distans ki genyen ant de pwen objè a pi piti pase distans rezolisyon an, de pwen yo pral fè erè pou yon pwen, epi estrikti li yo pa ka wè klè. Rezolisyon mikwoskòp la detèmine pa lantiy objektif la. Eyepieces sèlman agrandi epi yo pa ogmante rezolisyon mikwoskòp la.
Nan ka ekleraj santral nòmal, distans rezolisyon d nan lantiy objektif la detèmine pa fòmil sa a.
d=(λ/2)N.A.
Nan fòmil la: d reprezante distans rezolisyon an, inite a se mikron, λ reprezante longèdonn limyè ekleraj la, inite a se mikron tou.
Nan limyè vizib, longèdonn ki gen pi gwo klète ak pi sansiblite nan je moun se {{0}}.55 μm, ak NA maksimòm nan lantiy objektif la se 1.4. Ranplase nan fòmil ki anwo a, d se apeprè 0.2 μm. Sa vle di, ak yon mikwoskòp optik òdinè, limit distans rezolisyon an se 0.2 μm nan ka ekleraj santral. Sa vle di, mikwoskòp optik òdinè pa ka fè distenksyon ant de objè ki pi piti pase 0.2 μm.
Sèvi ak limyè iltravyolèt, longèdonn limyè ekleraj la ka redwi, sa ki pèmèt distans rezolisyon an rive nan 0.1 μm. Men, reyon iltravyolèt pa ka wè pa je imen an. Li ka sèlman obsève apre yo fin pran yon foto.
Longèdonn koule elèktron se sèlman 0.00387nm. Sèvi ak "lantiy elèktron" oswa lantiy mayetik pou kontwole koule elektwon, distans rezolisyon mikwoskòp elèktron se jiska kèk dizyèm nanomèt. Li ka itilize yo obsève estrikti nan atòm.
(3) Agrandisman
Agrandisman mikwoskòp la egal a pwodwi agrandisman lantiy objektif la ak agrandisman oculaire a. Nan prensip, agrandisman an ka fè gwo anpil. Sepandan, si detay yo nan echantiyon an pa ka rezoud pa lantiy la objektif, kèlkeswa ki jan gwo agrandisman an se, li pa gen sans. Teyorikman, li ka dedwi ke agrandisman ki pi apwopriye nan mikwoskòp la (ki rele agrandisman efikas, reprezante pa M efektivman) se ant 500 ak 1000 fwa ouvèti nimerik lantiy objektif la. Sa vle di, 500N.A. Mwens pase oswa egal a M efikas Mwens pase oswa egal a 1000N.A.
Nan seri agrandisman efikas, je yo ka obsève pou yon tan long san fatig. Si agrandisman an pi ba pase 500 NA, li pral difisil pou obsève. Si li pi wo pase 1000N.A., li pral deteryore kalite imaj la e menm lakòz yon imaj reyèl. Se poutèt sa, agrandisman an sou 1000N.A. yo rele agrandisman envalid.
(4) Travay distans
Distans k ap travay la refere a distans ki genyen ant sifas ki pi ba nan lantiy objektif la ak sifas anwo glas kouvèti a apre yo fin konsantre mikwoskòp la, lè l sèvi avèk yon glas kouvèti estanda ak yon longè tib mekanik estanda. Pi wo agrandisman lantiy objektif la, se pi kout distans k ap travay la. Anjeneral, distans k ap travay nan lantiy objektif ki ba-pouvwa ki anba a 10 fwa se 5-7mm, pandan y ap distans k ap travay nan lantiy la 100 fwa lwil oliv se sèlman apeprè 0.19mm.
(5) Pwofondè konsantre
Lè mikwoskòp la konsantre sou yon sèten avyon nan echantiyon an, se pa sèlman avyon objè a ka wè klè, men tou, avyon objè anwo ak pi ba ki konekte ak li ka wè klè an menm tan an. Distans ki genyen ant plan objè anwo ak pi ba yo rele pwofondè konsantre, oswa pwofondè konsantre pou kout.
Pwofondè konsantre nan mikwoskòp la piti anpil, ak pi gwo ouvèti a nimerik, se pi gwo agrandisman total la, ak pi piti pwofondè nan konsantre. Pa egzanp, lè w ap itilize yon lantiy lwil oliv ki gen yon NA 1.25/100 fwa ak yon oculaire 12.5 fwa pou obsève, pwofondè konsantre se sèlman 0.27 μm. Sa vle di, apre konsantre, se sèlman yon kouch mens 0.27 μm epè ka wè klè nan yon moman. Espesimèn òdinè yo jeneralman plizyè mikron epè. Pou wè echantiyon an antye, li nesesè yo sèvi ak mekanis amann-akor nan mikwoskòp la yo obsève nan kouch soti anwo jouk anba.
(6) jaden de vi
Se jaden an de vi yo rele tou jaden an de vi. Refere a dimansyon objè a anba enspeksyon ke mikwoskòp la ka wè nan yon sèl fwa. Anjeneral nou vle jaden an de vi yo dwe pi gwo ke posib. Se jaden an de vi nan mikwoskòp la detèmine pa jaden an nan vi nan lantiy la objektif ak jaden an nan vi nan oculaire a. Jaden de vi nan lantiy objektif òdinè se mwens pase 20mm, ak yon sèl nan gwo ka rive jwenn plis pase 40mm. Jaden de vi òdinè 10x oculaires se 14mm, ak gwo yo ka rive nan plis pase 24mm. Yon fwa ke objektif la ak oculaire yo fèt, jaden yo fikse. Paske jaden vizyon yon mikwoskòp jeneral piti, li enposib wè echantiyon an antye nan yon sèl jaden vizyon, se sèlman yon ti sèk sou echantiyon an ka wè. Anplis, gwosè a nan jaden an de vi se envès pwopòsyonèl ak agrandisman total mikwoskòp la. Pi gwo agrandisman total la, se pi piti jaden an de vi. Solisyon an se sèvi ak move a pou fè chak pati nan echantiyon an antre nan jaden an nan vi nan vire epi obsève nan vire.
(7) Iwa klète
Klere glas refere a limyè ak fènwa imaj objè yo wè nan mikwoskòp la. Yo nan lòd yo fasilite obsèvasyon, nou espere ke imaj la ki kapab lakòz se pi klere. Nan ka limyè ekstèn konstan, klète glas la se pwopòsyonèl ak kare a nan Ouverture a nimerik ak envès pwopòsyonèl ak kare a nan agrandisman total la. Pou fè imaj la pi klere, yo ta dwe itilize yon lantiy objektif ki gen yon gwo ouvèti nimerik ak yon oculaire agrandisman ki ba. Pou egzanp, nan ka a nan menm lantiy objektif la, lè l sèvi avèk yon oculaire 5X ap pwodui yon imaj glas ki se 4 fwa pi klere pase lè l sèvi avèk yon oculaire 10X.
Pou mikwoskòp ki sèvi ak sous limyè elektrik, klète imaj glas la ka kontwole pa ajiste klète limyè a.
(8) Klè
Klè nan D 'mikwoskòp depann sou sistèm optik li yo, espesyalman pèfòmans optik nan lantiy la objektif. Li gen rapò ak konsepsyon, fabrike, itilizasyon ak depo mikwoskòp. Li se yon pwoblèm enpòtan ak konplèks. Soti nan pèspektiv nan itilizasyon ak depo, rezon prensipal ki afekte klète a se: epesè nan glas kouvèti a itilize pa kalifye, konsantre a pa ajiste nan pozisyon ideyal la, agrandisman total la twò gwo, ak lantiy la nan lwil oliv la. lantiy pa siye. Netwaye, kanni lantiy, elatriye.
