Fluoresans pri ki ba ak konsepsyon mikwoskòp jaden klere
Nan gid sa a, mwen pral revize prensip debaz yo nan mikwoskòp fliyoresan ak ki jan yo konstwi twa diferan mikwoskòp fliyoresan a pri ki ba. Sistèm sa yo anjeneral koute dè milye de dola, men efò ki sot pase yo te fè yo pi fasil jwenn. Konsepsyon m ap prezante la a sèvi ak smartphones, dSLR, ak mikwoskòp USB. Tout desen sa yo ka itilize tou kòm mikwoskòp jaden ouvè.
Etap 1: Apèsi sou mikwoskospi fluoresans
Pou konprann konsèp debaz yo nan mikwoskospi fluoresans, imajine forè yo dans, pye bwa, bèt, touf, ak lòt forè ki ap viv nan forè a nan mitan lannwit. Si ou klere yon flach nan forè a, ou pral wè tout estrikti sa yo epi li difisil imajine bèt oswa plant espesifik. Sipoze ou sèlman enterese nan wè ti pyebwa blueberry nan forè a. Pou reyalize sa a, ou bezwen antrene lusyol pou sèlman atire pa touf blueberry, se konsa ke lè ou gade nan forè a, sèlman touf blueberry pral limen. Ou ka di ke ou make touf raje yo ak lusyol, konsa ou ka wè estrikti yo blueberry nan forè a.
Nan analoji sa a, forè a reprezante echantiyon an antye, ti pyebwa a blueberry reprezante estrikti ou vle vizyalize a (tankou selil espesifik oswa òganèl subselilè), ak lusyol yo se konpoze fliyoresan. Sitiyasyon an nan tire yon flach pou kont li san yo pa lusyol se menm jan ak yon mikwoskòp jaden klere.
Pwochen etap la se konprann fonksyon debaz yo nan konpoze fliyoresan (yo rele tou fluorofor). Gwoup fliyoresan yo se aktyèlman ti objè (nanoskal) ki fèt pou konekte estrikti espesifik nan echantiyon an. Yo absòbe limyè nan yon seri etwat longèdonn epi yo re emèt limyè nan yon lòt longèdonn. Pou egzanp, yon gwoup fliyoresan ka absòbe limyè ble (sa vle di gwoup la fliyoresan eksite pa limyè ble) ak Lè sa a, emèt limyè vèt ankò. Anjeneral, sa a se rezime atravè eksitasyon ak emisyon spectre (jan yo montre nan figi ki anwo a). Tablo sa yo montre longèdonn limyè ki absòbe pa fluorofò a ak longèdonn limyè ki emèt pa fluorofò a.
Desen an nan mikwoskòp la sanble anpil ak sa yo ki nan yon mikwoskòp regilye jaden louvri, ak de diferans prensipal yo. Premyèman, limyè ki eklere echantiyon an dwe nan longèdonn gwoup fliyoresan eksite (pou egzanp ki anwo a, limyè a se ble). Dezyèmman, mikwoskòp la sèlman bezwen kolekte limyè ki emèt (limyè vèt) pandan y ap bloke limyè ble. Sa a se paske limyè ble se toupatou, men limyè vèt sèlman soti nan estrikti espesifik nan echantiyon an. Pou bloke limyè ble, mikwoskòp anjeneral gen yon bagay ki rele yon filtè pase long ki pèmèt limyè vèt pase san limyè ble. Chak filtre pase long gen yon longèdonn koupe. Si longèdonn limyè a pi gran pase longèdonn koupe a, li ka pase nan yon filtè. Se poutèt sa, non an se "Long Distance Pass". Longèdonn ki pi kout yo bloke.
Etap 2: Modèl yon mikwoskòp lè l sèvi avèk optik optik
Sa a se yon etap adisyonèl nan konsepsyon prensip debaz yon mikwoskòp. Pa gen okenn nesesite yo bati yon mikwoskòp fliyoresan, kidonk si ou pa vle fouye nan optik, ou ka sote li.
Tou de jaden klere ak mikwoskòp fliyoresan yo ka modle lè l sèvi avèk aparèy optik ray. Premis debaz nan optik ray se ke konpòtman an nan limyè se menm jan ak sa yo ki nan limyè pwopaje lwen yon sous limyè. Lè w gade nan sal la, w ap wè limyè solèy la deyò fenèt la oswa limyè anpoul la pote. Lè sa a, limyè a absòbe oswa reflete pa objè nan sal la. Gen kèk limyè reflete ap fè li fè fas a je ou. Si yon objè eklere, ou ka imajine chak pwen sou objè a emèt limyè nan tout direksyon (jan yo montre nan imaj ki anwo a). Lantiy la, tankou lantiy nan je nou, konsantre limyè a nan yon pwen pou nou ka wè objè a. San yon lantiy, limyè kontinye pwopaje deyò epi yo pa fòme yon imaj.
