Karakteristik ak aplikasyon pou mikwoskòp lazè konfokal
Lazè eskanè mikwoskòp konfokal (LSCM) se yon kalite mikwoskòp ki fèt ki baze sou teknoloji konsantre konjige, se sa ki, fè sous la limyè lazè, echantiyon an anba tès ak detektè a tout nan pozisyon konjige youn ak lòt.
Fondamantal
An jeneral mikwoskòp, plan fokal lantiy objektif la kowenside ak detektè a pou ke plan imaj obsève a izole nan plan axial adjasan a, pandan y ap nan mikwoskòp konfokal, echantiyon an eklere lè l sèvi avèk yon plas limyè difraksyon limite, ak nan mikwoskòp konfokal la. Efè izolasyon sa a reyalize lè w itilize yon pinhole nan chemen limyè koleksyon an nan pwen fokal konjige tach la pou filtre limyè ki pèdi pou amelyore rezolisyon an.
Karakteristik D '
Se sèlman limyè a reflete tounen soti nan kouch echantiyon konjige a ka pase nan ti twou a nan chemen an limyè koleksyon, ak rès refleksyon echantiyon kouch echantiyon yo bloke pa ti twou a. Sa ka lakòz yon ogmantasyon siyifikatif nan rezolisyon an. Yo montre anba a yon konparezon kòt a kòt nan mikwoskospi fliyoresan miltidimansyonèl ak mikwoskospi konfokal nan menm echantiyon an epè. Lè yo pran yon seri imaj nan diferan plan fokal, sa ki souvan refere yo kòm yon "z-stack" ka pwodwi, ak imaj sa a montre tou de rezolisyon ak pwogrè nan kontras yo ofri nan mikwoskospi konfokal ak kòz ki kache nan pwogrè sa yo. Egzamine imaj la nan tèt pil la ak plan D 'anwo tisi a revele yon anpil nan limyè gaye nan imaj la fliyoresan, tandiske imaj la konfokal parèt nwa. Sa a rediksyon nan PSF nan direksyon axial responsab dirèkteman pou diferans lan nan rezolisyon obsève nan koòdone optik la nan mitan an nan z-pile a.
Yon lòt karakteristik nan mikroskopi konfokal lazè optik se ke li se yon teknoloji D optik. Teknoloji tradisyonèl ekleraj lajè jaden an eklere echantiyon an antye, kidonk imaj la ka dirèkteman kaptire pa je a toutouni oswa yon detektè, men LSCM sèvi ak yon gwo bout bwa oswa plizyè travès konsantre pase nan echantiyon an pou optik ak D, ak imaj la ki kapab lakòz se yo rele yon seksyon optik. Sa ki anba la a montre diferans ki genyen ant metòd ekleraj tradisyonèl lajè-jaden ak metòd ekleraj konfokal lazè optik.
Se poutèt sa, yon metòd travay pratik nan yon mikwoskòp konfokal modèn yo montre nan figi ki anba a. Limyè eksitasyon ki emèt pa lazè a pase nan yon glas dichroic epi analize nan direksyon x ak y echantiyon an atravè yon pè miwa vibre. Eksitasyon an (oswa refleksyon) echantiyon an Limyè a antre nan detektè PMT la nan pinhole la epi li anrejistre, epi òdinatè a rekonstwi imaj la analize pou jwenn imaj echantiyon aktyèl la.
