Tandans Devlopman nan mikwoskopi konfokal
Yo nan lòd yo jwenn pi bon rezilta obsèvasyon nan nivo teknik, mikwoskopi konfokal konsantre sou amelyore nivo teknik nan aspè yo nan amelyore rezolisyon, diminye fototoksisite, ogmante vitès optik, obsève echantiyon epè, ak obsève nan vivo. Kounye a, li efikas Z. Ki sa ki ankouraje Zda pou teknoloji mikwoskòp konfokal se mikwoskòp rezolisyon ultra-wo, ki kraze nan limit optik la epi ki pèmèt chèchè yo jwenn estrikti selil ki pi rafine, ki se fezab nan konpreyansyon pi fon chèchè yo nan aktivite lavi yo. Pwochen konsantre rechèch teknoloji mikwoskopi konfokal la ta dwe konsantre sou pwen sa yo:
1. Vitès optik pi vit
Kounye a, vitès la optik konfokal limite pa estrikti nan mekanik nan ekipman an optik, epi rezolisyon an ka sèlman sakrifye yo nan lòd yo jwenn yon vitès optik pi vit. Anpil pwosesis byolojik yo tèlman rapid ke yo rete endeslabl.
2. Plis pafè ultra-wo rezolisyon teknoloji
Kounye a, teknoloji ultra-wo rezolisyon yo enkli STORM, PALM, STED, ak SSIM, ak rezolisyon ki sòti nan 20 a 200 nm, men chak teknoloji gen sèten domaj, tankou pwosesis echantiyon, direksyon aks Z, fototoksisite, elatriye. pa prèske pafè, epi li souvan difisil pou reyalize rezolisyon limit la nan obsèvasyon aktyèl la.
3. pi fò konpatibilite
Teknoloji mikwoskospi konfokal enplike nan yon varyete metòd eksitasyon, tankou obsèvasyon multiphoton ak fèy limyè mansyone pi wo a, ak aderan anti-Stokes Raman gaye ka teyorikman pataje yon seri sistèm lazè. Mikwoskopi super-rezolisyon ka asosye ak teknoloji lazè blan. Sepandan, akòz pwoblèm patant divès konpayi yo, toujou gen plas pou amelyorasyon an tèm de konplè ak konpatibilite, ak ekipman aktyèl la pa ka bay tout avantaj teknik aplikasyon an.
Prensip Mikwoskopi konfokal
Mikwoskòp konfokal konpoze de kat pati: mikwoskòp sistèm optik, sous limyè lazè, eskanè ak deteksyon ak sistèm pwosesis. Li itilize lazè ak bon koerans kòm sous limyè. Li adopte prensip konjige konsantre ak aparèy sou baz mikwoskòp optik tradisyonèl, epi li sèvi ak òdinatè Yon seri obsèvasyon, analiz ak sistèm pwodiksyon pou tretman imaj.
Lazè eskanè gwo bout bwa a pase nan pinhole griyaj la pou fòme yon sous limyè pwen, ki reflete nan lantiy objektif la atravè splitter gwo bout bwa a, konsantre sou echantiyon an epi tcheke. Apre echantiyon an eksite, fliyoresans ki emèt la retounen nan espektwoskòp la epi rasanble li nan pinhole deteksyon an, ak Lè sa a, li konvèti nan yon siyal elektrik pa tib la fotomultiplikatè ak transmèt nan òdinatè a montre yon imaj klè avyon fokal. Limyè eksitasyon an konsantre sou echantiyon an atravè pinhole griyaj la, epi fliyoresans konsantre sou pinhole a atravè lantiy objektif la. Pwosesis sa a fòme de konsantre, kidonk li rele yon mikwoskòp konfokal.
Echantiyon byolojik òdinè gen yon estrikti konplèks ak yon epesè sèten. Lè yo obsève ak yon mikwoskòp fluoresans òdinè, fliyoresans ki emèt pa echantiyon an sipèpoze youn ak lòt, epi rezolisyon imaj la redwi anpil.
D 'konfokal nan mikwoskòp konfokal la ka efektivman siprime limyè ki pèdi a ak limyè ki pa mezi deyò avyon an fokal soti nan k ap antre nan detektè a, reyalize yon sèl D nan avyon fokal, ak anpil amelyore rezolisyon an. Lè etap la deplase inifòm nan direksyon orizontal, li ka fòme yon imaj klè yon sèl-kouch, ak nan direksyon vètikal la, li ka reyalize optik kouch pa kouch echantiyon an nan diferan pwofondè, epi jwenn estrikti ki genyen twa dimansyon. nan echantiyon an apre rekonstriksyon twa dimansyon, ki se sa yo rele "optik CT la". Yo make echantiyon an ak yon sond fliyoresan epi yo obsève ak yon mikwoskòp konfokal. Se pa sèlman yo ka obsève divès selil fiks ak estrikti tisi, men tou, mòfoloji, estrikti ak iyon selil k ap viv yo ka obsève kalitatif ak quantitative ak mezire regilyèman.
