Konsepsyon nan mikwoskòp fliyoresans ak Brightfield a pri ki ba
Etap 1: Apèsi sou mikwoskopi fluoresans
Pou konprann konsèp debaz mikwoskospi fluoresans, imajine yon forè dans nan mitan lannwit ak pye bwa, bèt, touf ak lòt forè k ap viv ladan l. Si ou klere yon flach nan forè a, ou pral wè tout estrikti sa yo epi li difisil imajine bèt oswa plant espesifik. Sipoze ou sèlman enterese nan wè ti pyebwa blueberry nan forè a. Pou reyalize sa, ou bezwen antrene lusyol pou sèlman atire touf blouberi, se konsa ke lè ou gade nan forè a, sèlman touf blouberi yo pral limen. Ou ka di ke ou sèvi ak lusyol pou make raje raje, pou ou ka wè estrikti blueberry nan forè a.
Nan analoji sa a, forè reprezante echantiyon an antye, ti pyebwa blueberry reprezante estrikti ou vle visualize yo (tankou selil espesifik oswa òganèl subselilè), ak lusyol yo se konpoze fliyoresan. Sitiyasyon an nan eklere flach yon tirè a pou kont li san yo pa lusyol se menm jan ak yon mikwoskòp jaden klere.
Pwochen etap la se konprann fonksyon debaz yo nan konpoze fliyoresan (yo rele tou fluorofor). Gwoup fliyoresan yo se aktyèlman ti objè (nan nanokal la) ki fèt pou konekte estrikti espesifik nan echantiyon an. Yo absòbe limyè nan yon seri etwat longèdonn epi yo re emèt limyè nan yon lòt longèdonn. Pa egzanp, yon fliyofò ka absòbe limyè ble (sa vle di fliyofò a eksite pa limyè ble) epi answit re emèt limyè vèt. Anjeneral, sa a se rezime pa eksitasyon ak emisyon spectre (jan yo montre nan figi ki anwo a). Tablo sa yo montre longèdonn limyè fliyofò yo absòbe ak longèdonn limyè fliyofò yo emèt.
Konsepsyon mikwoskòp la sanble anpil ak yon mikwoskòp regilye jaden klere, ak de diferans prensipal yo. Premyèman, limyè ki eklere echantiyon an dwe nan longèdonn ki eksite gwoup fliyoresan an (pou egzanp ki anwo a, limyè a se ble). Dezyèmman, mikwoskòp la sèlman bezwen kolekte limyè a emèt (limyè vèt) pandan y ap bloke limyè ble. Sa a se paske limyè ble se tout kote, men limyè vèt sèlman soti nan estrikti espesifik nan echantiyon an. Pou bloke limyè ble, mikwoskòp anjeneral gen yon bagay yo rele yon filtè pase long ki pèmèt limyè vèt pase san limyè ble. Chak filtè pase ba gen yon longèdonn koupe. Si longèdonn limyè a pi gran pase longèdonn koupe a, li ka pase nan yon filtè. Se poutèt sa, non an se 'Pas Long Distance'. Longèdonn ki pi kout yo bloke.
Etap 2: Sèvi ak mikwoskòp modèl optik
Sa a se yon etap adisyonèl nan konsepsyon mikwoskòp ki baze sou prensip debaz yo. Pa gen okenn bezwen bati yon mikwoskòp fliyoresan, kidonk si ou pa vle fouye pi fon nan optik, ou ka sote li.
Tou de jaden klere ak mikwoskòp fliyoresan yo ka modle lè l sèvi avèk aparèy optik ray. Premis debaz nan optik ray se ke konpòtman an nan limyè se menm jan ak sa yo ki nan limyè pwopaje lwen yon sous limyè. Lè w gade nan sal la, w ap wè limyè solèy la deyò fenèt la oswa limyè anpoul la pote. Lè sa a, limyè a absòbe oswa reflete pa objè nan sal la. Gen kèk limyè reflete ap dirije l nan direksyon je ou. Si yon objè eklere, ou ka imajine ke chak pwen sou objè a emèt limyè nan tout direksyon (jan yo montre nan foto ki anwo a). Lantiy la, tankou lantiy nan je nou, konsantre limyè sou yon pwen pou nou ka wè objè yo. San yon lantiy, limyè kontinye pwopaje deyò epi yo pa fòme yon imaj.
