Ki kalite mikwoskòp yo itilize pou wè fòm selil mikwòb yo
Yon tèm kolektif pou tout ti òganis ki difisil pou moun yo obsève ak je toutouni. Mikwo-òganis gen ladan bakteri, viris, fongis, ak kèk alg. (Sepandan, kèk mikwo-òganis vizib a je toutouni, tankou dyondyon ki fè pati fongis, Ganoderma lucidum, elatriye) Viris yo se yon kalite "òganis ki pa selilè" ki konpoze de kèk eleman tankou asid nikleyik ak pwoteyin, men yo siviv dwe depann de selil vivan yo. Dapre diferan anviwònman ki egziste yo, yo ka divize an mikwo-òganis prokaryotik, mikwo-òganis espas, mikwo-òganis chanpiyon, mikwo-òganis ledven, mikwo-òganis maren, elatriye.
Wòl ak domaj nan mikwo-òganis:
Youn nan enpak ki pi enpòtan nan mikwo-òganis sou moun se prévalence de maladi enfeksyon. 50 pousan nan maladi imen yo ki te koze pa viris. Istwa mikwòb ki lakòz maladi moun se istwa lit konstan lèzòm ak yo. Èt imen te fè gwo pwogrè nan prevansyon ak tretman maladi, men nouvo ak reparèt enfeksyon mikwòb kontinye rive, tankou yon gwo kantite maladi viral ki manke dwòg efikas ki ka geri. Mekanis patojèn nan kèk maladi pa klè. Abi yon gwo kantite antibyotik gwo spectre te lakòz gwo presyon seleksyon, sa ki lakòz anpil tansyon mitasyon, ki mennen ale nan aparisyon rezistans dwòg, ak sante moun menase pa nouvo menas. Gen kèk viris segmenté ka mitasyon atravè rekonbinasyon oswa reasòtiman. Egzanp ki pi tipik se viris grip la.
Apre yo fin konnen definisyon espesifik nan mikwo-òganis, ki kalite mikwoskòp ta dwe eksperimante a itilize lè etidye mikwo-òganis yo wè, ak ki mikwoskòp ka itilize yo wè pi byen, ak obsève ak analize fòm mikwòb komen.
Envansyon nan mikwoskòp la se pou kapab wè souri objè ki pa ka wè nan je toutouni. Gwosè mikwo-òganis yo piti anpil, kidonk yo dwe agrandi epi obsève avèk èd mikwoskòp. Anplis de sa, gen anpil kalite mikwo-òganis, kidonk fondamantalman pi fò nan mikwoskòp optik yo ka Obsève mikwo-òganis, pwochen kesyon an se ki kalite mikwoskòp yo ta dwe itilize pou obsèvasyon ak analiz de mikwo-òganis. Mikwoskòp komen pou obsèvasyon mòfoloji mikwòb gen ladan mikwoskòp byolojik, mikwoskòp kontras faz, mikwoskòp Envèse, mikwoskòp fluoresans, ak mikwoskòp konfokal. Mikwoskòp ak sou sa.
Sa ki anba la a dekri divès kalite mikwoskòp yo itilize pou obsève mikwo-òganis:
1. Mikwoskòp limyè òdinè
Limyè natirèl oswa limyè yo itilize kòm sous limyè a, ak longèdonn li se apeprè {{0}}.4 μm. Rezolisyon mikwoskòp la se yon mwatye nan longèdonn, sa vle di, 0.2 μm, ak pi piti imaj ki vizib a je toutouni se 0.2 mm. Se poutèt sa, lè l sèvi avèk yon glas lwil oliv (imèsyon) agrandi 1000 fwa ka elaji patikil 0.2μm yo nan 0.2mm vizib nan je toutouni. Mikwoskòp optik òdinè ka itilize pou obsèvasyon bakteri, aktinomisèt ak fongis.
2. Mikwoskopi Darkfield yo souvan itilize pou obsève mòfoloji ak mouvman mikwòb san tach. Apre kondansasyon jaden an fè nwa enstale nan mikwoskòp òdinè a, limyè a pa ka antre dirèkteman nan mitan an, ak jaden an de vi se nwa. Lè echantiyon an resevwa limyè oblik soti nan kwen kondansasyon an, li ka gaye, kidonk mikwo-òganis klere ka obsève nan background nan jaden nwa tankou bakteri oswa spirochèt.
3. Mikwoskòp kontras faz Mikwoskòp kontras faz sèvi ak efè limyè plak diferans faz la pou chanje faz limyè ak anplitid limyè dirèk, epi konvèti diferans faz limyè a nan diferans entansite limyè. Anba yon mikwoskòp kontras faz, lè limyè pase nan yon echantiyon san tach, diferans lan nan faz limyè ki te koze pa enkonsistans nan dansite diferan pati nan echantiyon an, epi yo ka obsève mòfoloji, estrikti entèn ak mòd mouvman nan mikwo-òganis.
4. mikwoskòp fluoresans mikwoskòp fluoresans se fondamantalman menm jan ak mikwoskòp optik òdinè, diferans prensipal la se sous limyè a, filtre ak kondansasyon. Kounye a, pifò nan yo sèvi ak aparèy epi-limyè, ak gwo presyon mèki lanp yo souvan itilize kòm sous limyè, ki ka emèt limyè iltravyolèt oswa ble-vyolèt. Gen de kalite filtè: filtre eksitasyon ak filtre absòpsyon. Anplis de kondansasyon jeneral ki byen klere, kondansasyon fè nwa yo ka itilize tou nan mikwoskòp fluoresans lè l sèvi avèk limyè ble pou amelyore kontras ant fliyoresans ak background. Metòd sa a aplikab pou deteksyon oswa idantifikasyon bakteri ki tache ak pigman fliyoresan oswa konbine avèk antikò fliyoresan.
5. Mikwoskòp elèktron sèvi ak koule elèktron kòm sous limyè a. Konpare ak limyè vizib, longèdonn lan se dè dizèn de milye de fwa diferan, ki anpil amelyore rezolisyon an. Se bobin mayetik la itilize kòm sistèm anplifikasyon optik, ak agrandisman an ka rive jwenn dè dizèn de milye oswa dè santèn de milye de fwa. Li se souvan itilize nan patikil viris. ak obsèvasyon ultrastructure bakteri.
Obsèvasyon espesimèn mikwòb san tach:
Yo ka itilize espesimèn ki pa tache an jeneral pou obsève mòfoloji bakteri, pouvwa ak mouvman. Bakteri yo san koulè ak transparan lè yo pa tache, epi yo obsève anba yon mikwoskòp sitou pa diferans ki genyen ant endèks refraktif bakteri yo ak anviwònman ki antoure a. Bakteri ki gen flagèl yo deplase kouray, pandan ke bakteri ki pa gen flagèl yo montre mouvman Brownyen iregilye. Bakteri solid tankou Treponema pallidum, Leptospira, ak Campylobacter gen fòm diferan ak modèl mouvman, ki gen siyifikasyon dyagnostik. Metòd souvan itilize yo se metòd gout presyon, metòd gout pendant ak metòd kapilè.
1. Metòd gout pandye Aplike vazlin alantou twou konkav nan glise pwòp vè konkav la, pran yon bag nan sispansyon bakteri ak yon bouk vaksinasyon epi mete l nan sant la nan glas kouvèti a, Lè sa a, aliman twou a konkav nan glise an vè konkav ak ti gout la nan sant la nan glas la kouvèti ak Mete kouvèti a sou, Lè sa a, vire l 'sou byen vit, alalejè peze glise kouvèti a fè li kole byen sere nan vazlin la sou kwen nan twou a konkav, ak Lè sa a, obsève anba yon gwo pouvwa. mikwoskòp (oswa jaden nwa).
2. Pran yon bag nan sispansyon bakteri ak yon bouk inokulasyon epi mete l nan sant la nan yon glise vè pwòp pa metòd gout presyon, epi dousman kouvri sispansyon bakteri an ak yon vè kouvèti, pran swen pou fè pou evite jenerasyon an nan bul lè epi anpeche sispansyon bakteri an soti nan debòde. Obsèvasyon Brightfield (oswa darkfield) anba yon lantiy ki gen gwo pouvwa.
3. Metòd kapilè a se sitou itilize pou egzamen sinetik bakteri anaerobik. Anjeneral chwazi 60~70mm longè. Apre sifonn sispansyon bakteri anaerobik la nan yon kapilè ki gen yon ouvèti 0.5-1.0 mm, sele de bout kapilè a ak yon flanm dife. Kapilè a te fikse sou glise an vè ak papye plastik, epi li te obsève anba yon lantiy gwo pouvwa nan jaden nwa.
Obsèvasyon echantiyon mikwòb ki tache ak yon mikwoskòp:
Apre echantiyon bakteri an tache, akòz kontras byen file nan koulè ant bakteri yo ak anviwònman ki antoure a, karakteristik mòfolojik bakteri yo (tankou gwosè, fòm, aranjman, elatriye) bakteri yo ak kèk estrikti espesyal yo ka. Obsève klèman anba yon mikwoskòp optik òdinè (tankou kapsil, flagèl, espò, elatriye), epi yo ka klase ak idantifye bakteri yo dapre reyaksyon an tach.
(1) Pwosedi jeneral nan tach bakteri Pwosedi jeneral nan tach bakteri se: froti (seche)-fiksasyon-tach.
1. Fwoti Preparasyon san, sekresyon, ekskresyon, likid twou ak kilti likid, ak dirèk fim mens sou glisad vè; otopsi oswa tisi bèt ki enfekte, frote blesi a ak yon prelèvman koton pou pran echantiyon. Pou preparasyon koloni bakteri oswa gazon sou mwayen solid, premye sèvi ak yon bouk inokulasyon pran yon bag nan saline nòmal epi mete l nan sant la nan glise a, Lè sa a, sèvi ak yon bouk inokulasyon esteril pran yon ti kantite kilti ak moulen li. respire nan saline nòmal, epi gaye li nan 1cm2 Gwo oswa ti sifas ki pentire, kite l sèk natirèlman nan tanperati chanm oswa sèk dousman nan yon distans.
2. Objektif fiksasyon an se touye bakteri, koagulasyon pwoteyin bakteri ak estrikti, epi fasilite tach; ankouraje bakteri yo konfòme yo ak glise a pou evite ke yo te lave lwen pa dlo pandan lave; chanje pèmeyabilite nan bakteri nan koloran, ki se benefisye nan estrikti nan selil bakteri nan tach. Li anjeneral fiks pa chofaj ak yon flanm dife, epi li seche sèk la byen vit pase nan flanm dife a pou 3 fwa. Li pi bon pou pa boule po a sou do a nan men an lè li manyen glise a.
3. DYEING Dapre diferan rezon enspeksyon, chwazi diferan metòd DYEING pou DYEING. Lè DYEING, ajoute solisyon an lank gout pou ogmante pwoteksyon an.
4. Mordant Nenpòt sibstans ki ka amelyore afinite ant lank la ak objè a kolore, ranje lank sou objè a kolore epi lakòz yon chanjman nan pèmeyabilite nan manbràn selilè yo rele yon mordan. Souvan yo itilize yo se alun, asid tannik, sèl metal ak yòd, elatriye, epi yo itilize chofaj tou pou ankouraje koloran. Mordants yo ka itilize ant tach prensipal ak kontre, epi yo ka itilize tou apre fixation oswa ki genyen nan fixative ak tach.
5. Dekolorizasyon Nenpòt ajan chimik ki ka retire koulè objè kolore a rele yon dekolorizan. Etanol, asetòn, elatriye yo souvan itilize kòm dekolorizan. Ajan dekolorizan an ka detekte degre estabilite konbinezon bakteri ak koloran, ki ka itilize pou tach diferans.
6. Counterstaining Bakteri oswa estrikti yo ki te dekolorize yo souvan counterstained ak yon solisyon counterstain pou obsèvasyon fasil. Koulè a nan solisyon an counterstaining diferan de sa yo ki nan solisyon an DYEING prensipal yo fòme yon kontras byen file. Kontre a pa ta dwe twò fò, se konsa yo pa kouvri moute koulè a nan tach inisyal la.
