Ki avantaj ki genyen nan mikwoskòp lazè konfokal
Konpare ak mikwoskòp tradisyonèl lajè jaden, mikwoskòp konfokal lazè optik gen karakteristik definisyon segondè, rezolisyon segondè, ak sansiblite segondè. Li se lajman ki itilize nan jaden an nan byomedsin e li te vin tounen yon zouti D enpòtan nan jaden sa a. Poukisa confocal ka jwenn anpil lanmou, e ki avantaj li genyen? Atik sa a bay lis twa aspè yo diskite sou avantaj ki genyen nan konfokal.
Sèlman kolekte siyal la sou plan fokal la, fè imaj la klè nan flou
Se konsa, ki jan mikwoskopi konfokal reyalize avantaj sa a? Sa a se akòz pyès ki nan konpitè kle konfokal-pinhole a, jan yo montre nan Figi 2. Li se yon ti twou devan detektè a epi li mete sou avyon an optik konjige nan plan fokal echantiyon an. Lè limyè eksitasyon an irradiate echantiyon an, tou de plan fokal la ak plan ki pa fokal nan zòn echantiyon an pral eksite pou jenere siyal fliyoresan, ajiste gwosè pinhole ki apwopriye a (anjeneral 1 Au), pou siyal fluoresans lan sou plan fokal la. (liy pwentiye vèt) ka siyal Fluoresan (liy tirè wouj ak ble) ki pase nan pinhole a pou rive jwenn detektè a soti nan plan fokal la pa ka rive jwenn detektè a atravè pinhole la. Atravè adisyon nan pinholes pyès ki nan konpitè, konfokal la ka jwenn imaj klè ak bon jan kalite san yo pa chanje metòd pou fè mikwoskòp fluoresans òdinè.
Akòz egzistans pinhole a, nou ka sèlman jwenn siyal la sou plan fokal la epi jwenn yon imaj ki genyen de dimansyon rezolisyon segondè. Pa kontinyèlman ajiste pozisyon Z-aks la, imaj ki genyen de dimansyon nan diferan pozisyon Z-aks ka jwenn, epi yo ka jwenn yon seri imaj kontinyèl "optik tranch". Apre ou fin jwenn tranch optik sa yo, modil 3D ekipe ak lojisyèl enstriman an ka itilize pou rekonstwi imaj 3D la pou konstwi yon imaj 3D klè. Sa a ki pa destriktif, koleksyon kontinyèl nan imaj optik tranch reyalize fonksyon an nan "selil CT".
Presizyon rezilta colocalisation se pre relasyon ak rezolisyon imaj la, kidonk nou bezwen chwazi yon metòd D 'pi wo rezolisyon lè nou fè eksperyans colocalisation. Konpare ak mikwoskòp tradisyonèl yo, mikwoskòp konfokal te vin tounen yon zouti pwisan pou rechèch colocalisation akòz avantaj wo-rezolisyon li yo.
Akòz egzistans limit diffraction, rezolisyon optik konfokal konvansyonèl la se alantou 200nm. Lè nou bezwen obsève estrikti ki pi gwo pase 200nm, konfokal ka detèmine avèk presizyon degre colocalisation. Si analiz colocalisation mande, modil analiz colocalisation ekipe nan lojisyèl confocal ka chwazi.
