Kondisyon pou preparasyon echantiyon woutin pou mikwoskopi
Mikwoskòp konfokal se yon nouvo pwodwi gwo teknoloji ki fè epòk devlope nan ane 1980 yo, epi li se youn nan enstriman analyse enpòtan nan byoloji molekilè ak syans lavi jodi a. Mikwoskòp konfokal baze sou D 'mikwoskòp fliyoresan ak yon aparèy optik lazè te ajoute, lè l sèvi avèk yon òdinatè pou tretman imaj pou jwenn imaj fliyoresan nan mikwostrikti a andedan selil oswa tisi yo, epi yo obsève chanjman nan mòfoloji a nan anpil machin siyal fizyolojik nan nivo subselilè. Vin yon zouti rechèch pwisan nan domèn mòfoloji, byoloji selil molekilè, nerosyans, famasi, jenetik ak lòt domèn syantifik.
Preparasyon echantiyon pou mikwoskopi konfokal se yon etap enpòtan anvan deteksyon. Echantiyon yo dwe make ak sond fliyoresan (yon sèl, doub, trip).
la
Espesimèn yo ka fiks oswa tisi vivan, oswa kilti aderan fiks oswa k ap viv. Selil yo ta dwe kiltive sou asyèt espesyal ti kilti Confocal oswa kouvèti. Sispann selil yo, souke oswa lage tranch yo, epi kouvri yo ak kouvèti fim kouvri. Epesè Zda echantiyon an se sou 1 ~ 2mm, epesè nan kouvèti a vè yo itilize yo ta dwe mwens pase 0.17mm, ak epesè nan glas la glise yo ta dwe ant 0.8 ~ 1.2 mm, ak sifas la se lis, epesè a se inifòm, epi pa gen okenn fluoresans entèferans evidan. Mwayen aliye souvan itilize pou echantiyon fiks, ak gliserin ki prepare nan PBS ak yon pH 8. 5-9 yo souvan itilize pou monte.
Kondisyon pou preparasyon echantiyon woutin:
1. Seleksyon nan koloran
Depi mikwoskòp konfokal la sèvi ak yon lazè yon sèl longèdonn kòm sous limyè, chwa pou yo koloran fliyoresan yo ta dwe baze sou longèdonn lazè a ekipe ak mikwoskòp konfokal la. Si gen plizyè koloran fliyoresan nan menm echantiyon an, longèdonn emisyon yo ta dwe konsidere tou otank posib. Pa sipèpoze pou evite pwoblèm kwa-koulè.
2. Seleksyon konpayi asirans echantiyon
Anjeneral, lantiy objektif gwo pouvwa a nan mikwoskòp konfokal se lantiy lwil oliv, ouvèti nimerik li yo piti, epi distans k ap travay ant lantiy la ak echantiyon an oblije pa plis pase 0.17mm. Glisad ak kouvèti yo byen. Si li sispann selil oswa patikil sispann, yon plat Petri dedye a yon mikwoskòp konfokal ka itilize pou pote echantiyon an pou obsèvasyon.
3. Seleksyon mwayen aliye
Si echantiyon an sèlman bezwen obsève yon fwa epi fliyoresans la pa fasil etenn, ou ka chwazi yon sèten konsantrasyon nan melanj gliserin pou sele glise a. Si echantiyon an bezwen mete pou yon peryòd de tan epi pran plizyè fwa, yo ta dwe chwazi yon mwayen aliye anti-fluoresan pou diminye pèt siyal fliyoresan.
