Prepare ak obsève echantiyon byolojik pou mikwoskopi elektwonik
Rezolisyon an nan mikwoskòp la depann sou longèdonn limyè a itilize, mikwoskòp elèktron a te kòmanse parèt an 1933 se akòz itilizasyon yon longèdonn ki pi kout pase limyè vizib gwo bout bwa a elèktron kòm yon sous limyè, se konsa ke rezolisyon an li ka reyalize pase mikwoskòp optik la anpil amelyore. Sous limyè diferan detèmine tou yon seri diferans ant mikwoskòp elèktron ak mikwoskòp optik la.
Dapre diferans ki genyen nan prensip D ' nan gwo bout bwa a elèktron ak wòl nan echantiyon an sou fason yo diferan, yo te mikwoskòp elèktron modèn yo te devlope yo fòme yon kantite kalite, kounye a * souvan itilize se mikwoskòp elèktron transmisyon ak optik elektwon. mikwoskòp, premye a ka nan yon seri 1,000-1,000,000 fwa agrandisman total seri chanjman yo, dènye a ka nan agrandisman total {{ {4}},000 fwa agrandisman total chanjman ki genyen ant. Eksperyans sa a konsantre sou preparasyon echantiyon yo genyen pou de kalite mikwoskòp, mikwoskòp elèktron transmisyon ak mikwoskòp elektwonik optik.
Materyèl
1. Souch Escherichia coli (Escherichia coli, Escherichia coli) slant.
2. Solisyon oswa reyaktif Amyl acetate, asid silfirik konsantre, etanòl anidrid, dlo esteril, 2% asid fosfotungstik sodyòm (pH 6.5-8.0) solisyon akeuz, 0.3% polyvinyl fòmaldeyid (fonn nan trichloromethane) solisyon, cytochrome c, amonyòm acetate, plasmid pBR322.
3. Enstriman oswa lòt ekipman Òdinè mikwoskòp optik, may kwiv, antonwa porselèn, beaker, plat plat, burèt esteril, pensèt esteril, lanse, glisad, ** plak konte, coater vakyòm, seche pwen kritik ak sou sa.
Etap operasyon yo
(I) Preparasyon echantiyon ak obsèvasyon mikwoskospi elektwonik transmisyon
1. Tretman nan may metal
Yo mete echantiyon pou mikwoskopi optik sou glisad pou obsèvasyon. Sepandan, nan mikwoskòp elèktron transmisyon, depi elektwon pa ka antre nan fèy vè a, se sèlman materyèl may dwe itilize kòm yon konpayi asirans, anjeneral yo rele may konpayi asirans. Ka transpòtè may divize an plizyè espesifikasyon diferan akòz diferan materyèl ak fòm, ki * souvan itilize a se may an kwiv 200-400 may (kantite twou). Yo ta dwe trete may kwiv anvan ou itilize pou retire pousyè tè a epi kenbe li pwòp, otreman li pral afekte bon jan kalite a nan fim nan sipò ak klè nan foto echantiyon yo. May kòb kwiv mete yo itilize nan eksperyans sa a se 400 may, ki ka trete nan fason sa a: premyèman, klowòks li ak acetate amil pou kèk èdtan, Lè sa a, rense l ak dlo distile pou plizyè fwa, ak Lè sa a, klowòks li nan etanòl anidrid pou dezidratasyon. Si may an kwiv pa metòd ki anwo a toujou pa pwòp, yo ka itilize yo delye asid silfirik konsantre (1:1) benyen nan 1 ~ 2 minit, oswa nan 1% solisyon NaOH bouyi pou plizyè minit, rense plizyè fwa ak dlo distile. , mete nan dezidratasyon etanòl anidrid, yo dwe itilize.
2. Preparasyon fim sipò
Nan obsèvasyon echantiyon an, nan rezo konpayi asirans lan ta dwe tou kouvri ak yon kouch fim inifòm, san estrikti, otreman ti echantiyon yo pral koule soti nan twou yo nan rezo konpayi asirans lan, kouch fim sa a anjeneral yo rele fim sipò oswa fim konpayi asirans lan. Fim sipò a ta dwe transparan pou elektwon, ak epesè li yo ta dwe jeneralman mwens pase 20nm; anba enpak la nan gwo bout bwa a elèktron, fim nan ta dwe tou gen yon sèten degre nan fòs mekanik, ka kenbe estabilite nan estrikti a, epi li gen bon konduktiviti tèmik; nplis de sa, rezo sipò a ta dwe pa gen okenn estrikti vizib anba mikwoskòp elèktron, epi li pa gen yon reyaksyon chimik ak echantiyon an pote, epi li pa entèfere ak obsèvasyon echantiyon an, ak epesè li se jeneralman sou 15nm. Fim sipò a ka fèt ak fim plastik (egzanp fim koton dife, fim fòmaldeyid polyethylene, elatriye), fim kabòn oswa fim metal (egzanp fim beryllium, elatriye). Anba kondisyon travay woutin, kondisyon yo ka satisfè ak yon fim plastik, pandan y ap preparasyon an nan fim nan plastik nan fim nan adezif koton dife se relativman fasil, men fòs la se pa osi fò ke fim polyethylene fòmaldeyid.
