Kondisyon epesè mikwoskòp optik pou glisad vè
Dezidratasyon mikwoskopik ak atachman echantiyon: Akòz santrifujasyon repete, selil yo pèdi, kidonk li pi bon pou tache selil yo sou sifas yon glise an vè oswa fèy plastik pou mikwoskospi optik, pou selil yo dezidrate epi seche ansanm ak glas la. glise oswa fèy plastik. Kondisyon pou epesè glisad vè nan mikwoskòp optik Pou pèmèt selil yo tache ak glisad vè oswa fèy plastik, li nesesè premye mete yon kouch fim sou glisad vè oswa fèy plastik. Metòd pou mete fim nan se jan sa a:
(1) Metòd ki pi senp pou mikwoskopi optik se mete yon kouch mens nan fim fòmèl (formvar) polyvinyl. Tranpe glisad yo netwaye nan (0.5-1) pousan solisyon klowofòm fòmèl polyvinyl. Apre atmosfè a volatilize, yon fim blan parèt sou glisad yo. Souke glisad yo plizyè fwa nan klowofò a pou fè fim nan chanje. Mens ak pare pou itilize.
(2) Depoze 0.1 latitid poly-L-lysine (fonn 1 mg poly-lysine nan 1 ml dlo filtre pandan preparasyon) sou glisad vè netwaye a, epi mete l nan yon bwat rezèv 450C apre ti gout la dewoule. . sèk. Metòd sa a pi bon paske poly-L-lysine chaje pozitivman, sa ki pèmèt plis sifas ki chaje negatif selil yo tache.
(3) Ajoute plasma ak gliserin nan dlo distile nan rapò (30--40) pousan ak (3-5) pousan selon kondisyon mikwoskòp optik la pou epesè glisewol la pou fòme yon pwoteyin gliserin. solisyon. Se likid la tonbe sou glise an vè netwaye, depliye epi sèk anba mikwoskòp optik la. Se fim nan pwoteyin mete benyen nan 2 pousan glutaraldehyde pou ranje pwoteyin nan, lave epi seche pou itilize pita. Anvan w itilize, plasma a tonbe sou fim pwoteyin. Fè li "aktive", rense l avèk tanpon apre 30 minit, epi li ka aplike dirèkteman.
Selil yo fiks ak netwaye yo fè yon konsantrasyon apwopriye nan sispansyon selilè ak dlo filtre anba yon mikwoskòp dijital, epi yo mete mikwoskòp optik la sou yon glise an vè oswa fèy plastik ki te kouvri ak yon manbràn, epi yo mete yo nan yon imid, ba. tanperati (40C) anviwònman (30-120) minit pou pèmèt selil yo tache ak manbràn an. Sèvi ak pensèt amann pou ranmase glise vè a epi souke l nan dlo pwòp distile, epi lave selil ki pa atache yo ak yon mikwoskòp optik. Kondisyon pou epesè glisad nan mikwoskòp optik Mikwoskòp polarize yo byen vit mete nan yon veso ki ranpli ak 50 pousan asetòn (oswa etanòl). Pwosesis dezidratasyon an se mete glisad yo nan asetòn oswa etanòl ak ogmante konsantrasyon chak 3 minit, ak mikwoskòp optik la oswa kontinyèlman ogmante konsantrasyon nan ajan an dezidrate nan veso an glise an vè. Dapre eksperyans laboratwa otè a, operasyon an lèt pi pratik. Metòd espesifik nan mikwoskòp optik ka souse mwatye nan ajan dezidratasyon an nan veso a chak 3 minit, epi ajoute yon kantite egal ajan dezidratasyon ak yon konsantrasyon 100 pousan. Apre 5-6 operasyon, konsantrasyon ajan dezidratasyon an nan veso pri mikwoskòp la rive pi wo pase 0.5 pousan, epi selil yo dezidrate avèk siksè. Apre siye pwen kritik, se glise an vè oswa fèy plastik kole nan waf echantiyon an ak adezif konduktif pou kouch metal. Genyen tou konvenyans pou atache selil yo nan manbràn mete desann pa twazyèm metòd la. Mikwoskòp optik ka pann selil yo fiks pa konsantrasyon ba nan glutaraldehyde sou fim nan pwoteyin "aktive". Mikwoskòp optik la mande pou epesè glise an vè yo mete pou 10 minit, epi glise an vè oswa fèy plastik tranpe nan 2 pousan glutaraldehyde. Apre 30 minit, rense l avèk dlo filtre doub distile, ak Lè sa a, dezidrate, sèk ak metal rad dapre metòd ki anwo a.
