Konesans ki gen rapò ak mikwoskopi fluoresans konfokal
Prensip debaz mikwoskopi fluoresans konfokal la se sèvi ak yon sous limyè pwen pou iradyasyon echantiyon an, fòme yon ti plas byen defini sou plan fokal la. Fliyoresans ki emèt pa tach la apre iradyasyon kolekte pa lantiy objektif la epi voye tounen nan espektrofotomèt la ki konpoze de yon glas koulè bidirectionnelle sou chemen iradyasyon orijinal la. Spectrophotometer la voye fliyoresans dirèkteman nan detektè a. Gen de pinholes devan sous limyè a ak detektè, yo rele respektivman pinholes lumières ak detection pinholes. Dimansyon jeyometrik de yo konsistan, anviwon 100-200nm; Konpare ak pwen limyè a sou plan fokal la, de yo konjige, sa vle di pwen limyè a pase nan yon seri lantiy epi finalman ka konsantre sou tou de pinhole ekleraj la ak pinhole deteksyon an ansanm. Nan fason sa a, limyè ki soti nan avyon an fokal ka konvèje nan seri a nan twou deteksyon an, pandan y ap limyè gaye soti nan pi wo a oswa anba avyon an fokal bloke deyò twou a deteksyon epi yo pa ka imajine. Pa eskanè echantiyon an pwen pa pwen ak yon lazè, tib la fotomultiplikatè apre detekte pinhole a tou jwenn imaj la konfokal korespondan nan pwen an limyè pwen pa pwen, ki se konvèti nan yon siyal dijital epi transmèt nan òdinatè a. Finalman, yon imaj konfokal klè nan tout plan fokal la sentèz sou ekran an.
Chak imaj avyon fokal se aktyèlman yon koup transvèsal optik echantiyon an, ki toujou gen yon epesè sèten, ke yo rele tou yon seksyon optik mens. Akòz lefèt ke entansite limyè a nan pwen fokal la pi gran pase sa ki nan pwen an ki pa fokal, ak limyè a avyon ki pa fokal filtre soti nan pinholes, pwofondè nan jaden nan sistèm konfokal la se apeprè zewo. Analyse nan direksyon aks Z ka reyalize tomografi optik, fòme yon tranch optik ki genyen de dimansyon nan plas fokal echantiyon an obsève. Lè w konbine optik XY avyon (avyon fokal) ak optik Z-aks (aks optik), yo ka jwenn yon imaj ki genyen twa dimansyon nan echantiyon an nan akimile kouch kontinyèl nan imaj ki genyen de dimansyon ak trete yo ak lojisyèl òdinatè espesyalize.
Pinhole deteksyon an ak pinhole sous limyè yo toujou konsantre sou menm pwen an, se konsa ke fluoresans eksite deyò avyon an konsantre pa ka antre nan pinhole deteksyon an.
Ekspresyon ki senp nan prensip k ap travay nan mikwoskospi konfokal lazè se ke li sèvi ak yon lazè kòm sous limyè a, epi li ajoute yon aparèy optik lazè ak yon aparèy konjige konsantre sou baz tradisyonèl mikwoskospi fluoresans D '. Li se yon sistèm kontwole pa yon òdinatè pou akizisyon imaj dijital ak pwosesis.
