Ki jan yo obsève mòfoloji selil mikwòb yo anba yon mikwoskòp?
Mikwoskòp yo te envante yo wè objè souri ki pa ka wè ak je toutouni. Mikwo-òganis yo piti anpil, kidonk yo dwe agrandi epi obsève avèk èd yon mikwoskòp. Anplis de sa, gen anpil kalite mikwo-òganis, kidonk fondamantalman pi mikwoskòp optik ka obsève mikwo-òganis. Pwochen kesyon an se ki kalite mikwoskòp ta dwe itilize pou obsèvasyon ak analiz de ki kalite mikwo-òganis. Mikwoskòp komen ki ka itilize pou obsève mòfoloji mikwòb gen ladan mikwoskòp byolojik, mikwoskòp kontras faz, mikwoskòp Envèse, mikwoskòp fluoresans, mikwoskòp konfokal, elatriye.
Sa ki anba la a dekri divès kalite mikwoskòp yo itilize pou obsève mikwo-òganis:
1. Òdinè mikwoskòp optik sèvi ak limyè natirèl oswa limyè kòm sous limyè a, ak longèdonn li yo apeprè 0.4 μm. Rezolisyon mikwoskòp la se yon mwatye nan longèdonn, sa vle di, 0.2 μm, ak pi piti imaj ki vizib a je toutouni se 0.2 mm. Se poutèt sa, lè l sèvi avèk yon glas lwil oliv (imèsyon) agrandi 1000 fwa ka elaji patikil 0.2μm yo nan 0.2mm vizib nan je toutouni. Mikwoskòp optik òdinè ka itilize pou obsèvasyon bakteri, aktinomisèt ak fongis.
2. Mikwoskopi Darkfield yo souvan itilize pou obsève mòfoloji ak mouvman mikwòb san tach. Apre kondansasyon jaden an fè nwa enstale nan mikwoskòp òdinè a, limyè a pa ka antre dirèkteman nan mitan an, ak jaden an de vi se nwa. Lè echantiyon an resevwa limyè oblik soti nan kwen kondansasyon an, li ka gaye, kidonk mikwo-òganis klere tankou bakteri oswa spirochèt ka obsève nan background nan jaden nwa.
3. Mikwoskòp kontras faz Mikwoskòp kontras faz sèvi ak efè limyè plak diferans faz la pou chanje faz limyè ak anplitid limyè dirèk, epi konvèti diferans faz limyè a nan diferans entansite limyè. Anba yon mikwoskòp kontras faz, lè limyè pase nan yon echantiyon san tach, diferans lan nan faz limyè ki te koze pa enkonsistans nan dansite diferan pati nan echantiyon an, epi yo ka obsève mòfoloji, estrikti entèn ak mòd mouvman nan mikwo-òganis.
4. Mikwoskòp fluoresans Mikwoskòp fluorescent se fondamantalman menm jan ak mikwoskòp optik òdinè, diferans prensipal la se sous limyè a, filtre ak kondansasyon. Kounye a, pifò nan yo sèvi ak aparèy epi-limyè, ak gwo presyon mèki lanp yo souvan itilize kòm sous limyè, ki ka emèt limyè iltravyolèt oswa ble-vyolèt. Gen de kalite filtè: filtre eksitasyon ak filtre absòpsyon. Anplis de kondansasyon jeneral ki byen klere, kondansasyon fè nwa yo ka itilize tou nan mikwoskòp fluoresans lè l sèvi avèk limyè ble pou amelyore kontras ant fliyoresans ak background. Metòd sa a aplikab pou deteksyon oswa idantifikasyon bakteri ki tache ak pigman fliyoresan oswa konbine avèk antikò fliyoresan.
5. Mikwoskòp elèktron sèvi ak koule elèktron kòm yon sous limyè, ak longèdonn lan se dè dizèn de milye de fwa diferan de limyè vizib, ki anpil amelyore rezolisyon an. Li itilize tou yon bobin mayetik kòm yon sistèm anplifikasyon optik, ak agrandisman an ka rive jwenn dè dizèn de milye oswa dè santèn de milye de fwa. Li se souvan itilize pou obsèvasyon patikil viris ak ultrastructure bakteri.
Obsèvasyon espesimèn mikwòb san tach:
Yo ka itilize espesimèn ki pa tache an jeneral pou obsève mòfoloji bakteri, pouvwa ak mouvman. Bakteri yo san koulè ak transparan lè yo pa tache, epi yo obsève anba yon mikwoskòp sitou pa diferans ki genyen ant endèks refraktif bakteri yo ak anviwònman ki antoure a. Bakteri ki gen flagèl yo deplase kouray, pandan ke bakteri ki pa gen flagèl yo montre mouvman Brownyen iregilye. Bakteri solid tankou Treponema pallidum, Leptospira, ak Campylobacter gen fòm diferan ak modèl mouvman, ki gen siyifikasyon dyagnostik. Metòd souvan itilize yo se metòd gout presyon, metòd gout pendant ak metòd kapilè.
1. Aplike vazlin alantou twou konkav glas pwòp konkav la pa metòd gout pandye, sèvi ak yon bouk vaksinasyon pou pran yon bag sispansyon bakteri epi mete l nan sant glas kouvèti a, Lè sa a, fè aliman twou konkav glas konkav la ak gout nan sant kouvèti kouvèti a epi kouvri l, apresa vire l byen vit, peze glas kouvèti a alalejè pou fè li kole byen nan vazlin nan kwen twou konkav la, epi obsève anba yon mikwoskòp gwo agrandisman (oswa). jaden nwa).
2. Pran yon bag nan sispansyon bakteri ak yon bouk inokulasyon epi mete l nan sant la nan yon glise vè pwòp pa metòd gout presyon, epi dousman kouvri sispansyon an bakteri ak yon vè kouvèti, pran swen pou fè pou evite bul ak debòde nan sispansyon an bakteri. . Apre w rete kanpe pou kèk segond, obsève anba yon mikwoskòp gwo pouvwa nan jaden klere (oswa jaden nwa).
3. Metòd kapilè a se sitou itilize pou egzamen sinetik bakteri anaerobik. Anjeneral chwazi 60~70mm longè. Apre sifonn sispansyon bakteri anaerobik la nan yon kapilè ki gen yon ouvèti 0.5-1.0 mm, sele de bout kapilè a ak yon flanm dife. Kapilè a te fikse sou glise an vè ak papye plastik, epi li te obsève anba yon lantiy gwo pouvwa nan jaden nwa.
Obsèvasyon echantiyon mikwòb ki tache ak yon mikwoskòp:
Apre echantiyon bakteri an tache, akòz kontras byen file nan koulè ant bakteri yo ak anviwònman ki antoure a, karakteristik mòfolojik bakteri yo (tankou gwosè, fòm, aranjman, elatriye) nan bakteri yo ak kèk estrikti espesyal (tankou. kòm kapsil, flagèl, espò, elatriye) ka byen klè obsève anba yon mikwoskòp optik òdinè, epi yo ka klase ak idantifye bakteri yo dapre reyaksyon an tach.
(1) Pwosedi jeneral nan tach bakteri Pwosedi jeneral nan tach bakteri se: froti (seche)-fiksasyon-tach.
1. Fwoti Preparasyon san, sekresyon, ekskresyon, likid twou ak kilti likid, ak dirèk fim mens sou glisad vè; otopsi oswa tisi bèt ki enfekte, frote blesi a ak yon prelèvman koton pou pran echantiyon. Pou preparasyon koloni bakteri oswa gazon sou mwayen solid, premye sèvi ak yon bouk inokulasyon pran yon bag nan saline nòmal epi mete l nan sant la nan glise an vè, Lè sa a, sèvi ak yon bouk inokulasyon esteril pran yon ti kantite kilti ak moulen. li respire nan saline nòmal, gaye li nan yon sifas kouvwi 1cm2, epi kite l sèk natirèlman nan tanperati chanm oswa tou dousman sèk nan yon distans.
2. Objektif fiksasyon an se touye bakteri, koagulasyon pwoteyin bakteri ak estrikti, epi fasilite tach; ankouraje bakteri yo konfòme yo ak glise a pou evite ke yo te lave lwen pa dlo pandan lave; chanje pèmeyabilite nan bakteri nan koloran, ki se benefisye tach la nan estrikti bakteri entraselilè. Li anjeneral fiks pa chofaj ak yon flanm dife, epi li seche sèk la byen vit pase nan flanm dife a pou 3 fwa. Li pi bon pou pa boule po a sou do a nan men an lè li manyen glise a.
3. DYEING Dapre diferan rezon enspeksyon, chwazi diferan metòd DYEING pou DYEING. Lè DYEING, ajoute solisyon an lank gout pou ogmante pwoteksyon an.
4. Mordant Nenpòt sibstans ki ka amelyore afinite ant lank la ak objè a kolore, ranje lank sou objè a kolore epi lakòz yon chanjman nan pèmeyabilite nan manbràn selilè yo rele yon mordan. Souvan yo itilize yo se alun, asid tannik, sèl metal ak yòd, elatriye, epi yo itilize chofaj tou pou ankouraje koloran. Mordants yo ka itilize ant tach prensipal ak kontre, epi yo ka itilize tou apre fixation oswa ki genyen nan fixative ak tach.
5. Dekolorizasyon Nenpòt ajan chimik ki ka retire koulè objè kolore a rele yon dekolorizan. Etanol, asetòn, elatriye yo souvan itilize kòm dekolorizan. Ajan dekolorizan an ka detekte degre estabilite konbinezon bakteri ak koloran, ki ka itilize pou tach diferans.
6. Counterstaining Bakteri oswa estrikti yo ki te dekolorize yo souvan counterstained ak yon solisyon counterstain pou obsèvasyon fasil. Koulè a nan solisyon an counterstaining diferan de sa yo ki nan solisyon an DYEING prensipal yo fòme yon kontras byen file. Kontre a pa ta dwe twò fò, se konsa yo pa kouvri moute koulè a nan tach inisyal la.
