Obsèvasyon fluoresans nan mikwoskòp optik
Fluoresans refere a pwosesis kote yon sibstans fliyoresan emèt limyè ki gen yon longèdonn ki pi long prèske an menm tan lè li iradyasyon ak limyè ki gen yon longèdonn espesifik (Figi 1). Lè limyè nan yon longèdonn espesifik (longèdonn eksitasyon) frape yon molekil, tankou sa ki nan yon fliyofò, enèji foton yo absòbe pa elektwon molekil la. Apre sa, elektwon yo tranzisyon soti nan eta tè a (S0) nan yon nivo enèji ki pi wo, eta a eksite (S1'). Pwosesis sa a rele eksitasyon①. Elektwon an rete nan eta eksite pou 10-9–{10-8 segonn, pandan sa elèktron an pèdi kèk enèji②. Pandan pwosesis elektwon yo kite eta eksitasyon an (S1) epi retounen nan eta tè a③, enèji ki rete a absòbe pandan pwosesis eksitasyon an libere.
Dyagram Fluoresan Jablonski
Tan rezidans molekil fliyoresan an nan eta a eksite se tout lavi fliyoresan, ki se jeneralman sou nivo nanosecond, epi li se yon karakteristik nannan nan molekil fliyoresan tèt li. Fluorescence Lifetime Imaging (FLIM), ki itilize fluoresans pou tout lavi D 'teknoloji, ka fè plis apwofondi mezi fonksyonèl nan adisyon a fluoresans entansite D, epi jwenn konfòmasyon molekilè, entèraksyon entèmolekilè, ak mikroanviwònman an nan molekil, elatriye Enfòmasyon ki difisil a. jwenn ak imaj optik konvansyonèl yo.
Yon lòt pwopriyete enpòtan nan fluoresans se chanjman nan Stokes, diferans ki genyen longèdonn ant eksitasyon ak pik emisyon (Figi 2). Tipikman longèdonn emisyon an pi long pase longèdonn eksitasyon an. Sa a se paske elektwon yo pral pèdi yon pati nan enèji yo atravè pwosesis detant la apre sibstans fliyoresan an eksite epi anvan yo lage foton. Sibstans fliyoresan ak pi gwo chanjman Stokes yo pi fasil pou obsève anba yon mikwoskòp fliyoresan.
mikwoskòp fliyoresan
Mikwoskòp fliyoresan se yon mikwoskòp optik ki itilize pwopriyete fliyoresan pou obsèvasyon ak imaj, epi li lajman ki itilize nan divès domèn tankou byoloji selilè, nerobyoloji, botanik, mikrobyoloji, patoloji, ak jenetik. D Fluorescence gen avantaj ki genyen nan sansiblite segondè ak espesifik, epi li trè apwopriye pou obsèvasyon distribisyon an nan pwoteyin espesifik ak òganèl nan tisi ak selil, etid la nan kolokizasyon ak entèraksyon, swiv nan pwosesis dinamik lavi tankou chanjman konsantrasyon ion. , elatriye.
Pifò molekil nan selil yo pa fliyoresan, epi si ou vle wè yo, ou make yo fluorescent. Gen anpil metòd pou etikèt fliyoresan, tankou etikèt dirèk (tankou lè l sèvi avèk DAPI pou mete etikèt sou ADN), oswa imunostaining lè l sèvi avèk pwopriyete yo antijèn-obligatwa nan antikò, oswa lè l sèvi avèk pwoteyin fliyoresan (tankou GFP, vèt fliyoresan pwoteyin) pou mete etikèt sou pwoteyin sib yo. , ak revèsib obligatwa. koloran sentetik (tankou Fura-2), elatriye.
Mikwoskòp Fluoresans Envèse MF53-N
Kounye a, mikwoskòp fliyoresan an te vin ekipman estanda D 'nan divès laboratwa ak platfòm D, epi li se yon bon èd pou eksperyans chak jou nou an. Mikwoskòp fliyoresan yo sitou divize an twa kategori: mikwoskòp fliyoresan dwat (apwopriye pou seksyon), mikwoskòp fliyoresan Envèse (apwopriye pou selil k ap viv, pran an kont seksyon), stereoskòp fliyoresan (apwopriye pou pi gwo espesimèn, tankou plant, zebrafish (granmoun/anbriyon). ), medaka, ògàn sourit/rat, elatriye).
Teknoloji D' mikwoskospi fliyoresan lajman itilize ak moun rich nan kalite, ak nouvo teknoloji yo toujou ap parèt. Ou ka chwazi teknoloji pou konplete pwòp rechèch ou.
