Metòd deteksyon mikwoskospi fliyoresan
mikwoskòp fliyoresan
Mikwoskopi fliyoresan se yon zouti fondamantal pou sitochimi imunofluoresan. Li konpoze de eleman prensipal tankou sous limyè, sistèm plak filtre, ak sistèm optik. Li itilize yon sèten longèdonn limyè pou eksite echantiyon an epi emèt fliyoresans, ki agrandi atravè yon sistèm objektif ak oculaire pou obsève imaj fluoresans echantiyon an (Figi 1).
(1) Sous limyè
Sèjousi, yon lanp mèki presyon ultra-wo 200W se souvan itilize kòm sous limyè a. Li fèt ak vè kwatz, ak yon fòm esferik nan mitan an ak yon sèten kantite mèki plen andedan. Pandan operasyon an, egzeyat ant de elektwòd yo lakòz mèki a evapore, ak presyon andedan esfè a ogmante rapidman. Lè mèki a konplètman evapore, li ka rive jwenn 50-70 presyon atmosferik estanda, ki jeneralman pran apeprè 5-15 minit. Luminesans nan lanp mèki ultra-wo presyon se rezilta nan egzeyat ki genyen ant elektwòd, ki kontinyèlman dissociate ak diminye molekil mèki ak emèt foton. Li emèt gwo limyè iltravyolèt ak ble vyolèt, ki ase pou eksite divès sibstans fliyoresan, kidonk li se lajman ki itilize nan mikwoskòp fliyoresan.
Prekosyon pou itilize yon mikwoskòp fliyoresan
(1) Fè egzateman swiv enstriksyon yo nan faktori a mikwoskòp fliyoresan epi pa chanje pwogram nan abitrèman.
(2) Enspeksyon ta dwe fèt nan yon chanm nwa. Apre w fin antre nan chanm nwa a, konekte kouran an epi limen lanp mèki ultra-wo presyon pou 5-15 minit. Apre sous limyè a emèt limyè fò ak estabilize, je yo ta dwe konplètman adapte yo ak chanm nwa a anvan yo kòmanse obsève echantiyon an.
(3) Pou anpeche UV domaj nan je yo, yo ta dwe mete linèt pwoteksyon lè ajiste sous limyè a.
(4) Tan enspeksyon an ta dwe 1-2 èdtan chak fwa. Si li depase 90 minit, entansite lumineux nan lanp mèki ultra-wo presyon piti piti diminye ak fliyoresans la febli; Espesimèn ki ekspoze a radyasyon iltravyolèt pandan 3-5 jou
Apre min, fliyoresans la tou siyifikativman diminye; Kidonk, dire maksimòm lan pa ta dwe depase 2-3 èdtan.
(5) Viv sous limyè mikwoskòp fliyoresan an limite, epi echantiyon an ta dwe egzamine santralman pou ekonomize tan.
Ekonomize tan ak pwoteje sous limyè a. Lè tan an cho, yo ta dwe ajoute yon fanatik elektrik pou gaye chalè ak refwadi. Lè w ranplase yon nouvo anpoul limyè, yo ta dwe anrejistre tan itilizasyon an depi nan konmansman an. Lè limyè a etenn epi ou vle sèvi ak li ankò, ou dwe tann pou anpoul limyè a refwadi ase anvan limen li. Evite limen sous limyè a plizyè fwa pa jou.
(6) Obsève echantiyon an imedyatman apre tach, paske fliyoresans la ap febli piti piti apre yon sèten tan. Si echantiyon an estoke nan yon sache plastik polyethylene nan 4 degre, li ka retade tan atenuasyon fliyoresans ak anpeche evaporasyon ajan an aliye.
(7) Kritè jijman pou klète fluoresans yo jeneralman divize an kat nivo, sètadi "yon sèl" - pa gen okenn oswa vizib fliyoresans fèb. "+" - Se sèlman fluoresans vizib ki vizib. ++- Vizib ak fliyoresans klere. "+++" - Fluoresans vizib ak klere tou.
