Diferans ak karakteristik ant mikwoskòp fluoresans ak mikwoskòp optik òdinè
Mikwoskòp fliyoresan diferan de mikwoskòp optik òdinè. Li pa obsève echantiyon an atravè ekleraj la nan sous limyè òdinè. Olye de sa, li sèvi ak limyè nan yon longèdonn sèten (anjeneral limyè iltravyolèt, limyè ble-vyolèt) eksite materyèl la fliyoresan nan echantiyon an anba mikwoskòp la, sa ki lakòz li emèt fliyoresans. Se poutèt sa, sous limyè a nan yon mikwoskòp fliyoresan pa sèvi kòm limyè dirèk, men kòm yon sous enèji ki eksite materyèl la fliyoresan entèn nan echantiyon an. Rezon ki fè nou ka obsève echantiyon an se pa akòz ekleraj sous limyè a, men fenomèn fliyoresan ki te koze pa materyèl fliyoresan nan echantiyon an absòbe enèji limyè eksite. Li ka wè ke karakteristik prensipal la nan yon mikwoskòp fliyoresan se ke sous limyè li yo ka bay yon gwo kantite limyè eksitasyon nan yon seri longèdonn espesifik, se konsa ke sibstans ki sou fliyoresan nan echantiyon an anba egzamen an ka jwenn entansite ki nesesè nan limyè eksitasyon. An menm tan an, mikwoskòp fliyoresan yo dwe gen sistèm filtre korespondan. Mikwoskopi fluoresans se yon zouti esansyèl pou istochimi fliyoresan avanse. Li konpoze de sous limyè ultra-wo presyon, sistèm filtre (ki gen ladan eksitasyon ak plak filtre suppression), sistèm optik ak sistèm fotografi. Li itilize limyè nan yon longèdonn sèten pou eksite echantiyon an emèt fliyoresans.
1. Fason pou eksite fluoresans: Dapre ranje longèdonn limyè a, li divize an de kalite: metòd eksitasyon UV (lè l sèvi avèk metòd iltravyolèt lumières) ak metòd eksitasyon BV (lè l sèvi avèk limyè ble-vyolèt). Metòd eksitasyon UV itilize limyè tou pre-iltravyolèt ki pi kout pase 400nm pou eksitasyon. Pa gen okenn limyè eksitasyon vizib nan metòd sa a, kidonk fliyoresans obsève a montre fliyoresans nannan nan lank la, ki fè li fasil yo fè distenksyon ant fliyoresans espesifik sou echantiyon an ak otofluoresans nan tisi a background.
2. BV eksitasyon metòd: eksitasyon soti nan iltravyolèt limyè ble santre nan 404nm ak 434nm. Metòd sa a sèvi ak limyè ble pou eklere echantiyon an, kidonk filtè koupe sistèm obsèvasyon fliyoresan an dwe itilize yon filtè ki ka konplètman bloke limyè ble epi konplètman pase fliyoresans vèt ak jòn ki nesesè yo. Koloran fliyoresan yo itilize nan metòd antikò fliyoresan. Longèdonn maksimòm absòpsyon limyè eksitasyon an ak longèdonn maksimòm emisyon fliyoresan yo relativman pre, kidonk filtè ki itilize nan metòd eksitasyon BV la dwe itilize yon filtè koupe byen file. Metòd sa a ka sèvi ak limyè ble kòm limyè eksitasyon, kidonk efikasite absòpsyon nan pigman fliyoresan se pi wo ak imaj pi klere ka jwenn. Dezavantaj la se ke fliyoresans anba a 500nm pa ka wè, pandan y ap fluoresans pi wo a 500nm fè imaj la tout antye parèt jòn. Nan metòd la antikò fliyoresan, se spesifik nan lank fliyoresan an sitou jije pa koulè inik li yo. Se poutèt sa, lè w ap diskite espesifikasyon sibtil la, enpèfeksyon yo mansyone anwo a nan metòd la eksitasyon BV souvan gen yon gwo enpak.
