Byomikwoskopi Konsènan Volim Blòk Tisi yo
Byolojik Mikwoskopi Jiskaprezan, fiksasyon frèt, seksyon ultramin jele ak siye friz se metòd woutin pou mikwoseksyon radyografi tisi ak selil. Detay yo nan metòd sa a yo eksplike jan sa a:
Pou mikwoskòp byolojik ak yon kondansasyon, oulwa a ka deplase leve, li desann pou fè klète a modere, epi ouvèti limyè varyab la ka chanje tou pou reyalize yon klète modere 9b. Si limyè a solèy, kondansasyon an ka leve yon fason ki apwopriye, epi ouvèti sous limyè varyab la ka elaji kòmsadwa. Si limyè a twò fò, lantiy kondansasyon an ka bese yon fason ki apwopriye, epi ouvèti limyè ki entèseksyon an ka redwi kòmsadwa. Si ou toujou santi klere tou nan ka sa a, ou ka chwazi yon filtè ki apwopriye epi mete l sou bracket la anba kondansasyon an. Oak sa a pral kapab jwenn klète ki satisfè ou. Natirèlman, ajiste pozisyon anwo ak pi ba kondansasyon an, ajiste gwosè ouvèti lekti optik varyab la epi chwazi yon filtè apwopriye mande pou yon sèten peryòd pratik pou jwenn eksperyans.
Yon pwoblèm trè enpòtan nan mikwoskospi byolojik se ke nan pwosesis pou pran echantiyon ak separe selil yo, apre friz-seche ak rezin embedding (FD), apre yo fin konjelasyon ultra-mens, ak apre friz-seche, kontni an nan 65 eleman nan chak pati. dwe okipe ak anpil atansyon. Selil yo dwe analize yo pa ka domaje. Paske mikwo-analiz radyografi pa sèlman enplike anpil etap, men tou, koute anpil. Si selil yo analize yo se selil ki domaje oswa selil ki mouri apre yon tan long ak pwosesis milti-etap, li trè regrèt pou tire konklizyon mal. Pou egzanp, cardiomyocytes separe pa tretman kolagenaz gen de fòm, youn se baton long
Byomikwoskopi Kantite ak distribisyon elektwolit nan de kalite selil sa yo byen diferan. Na trè wo ak K trè ba nan kardyomyosit sikilè, ak konsantrasyon nan ca nan nematod trè wo. Apre tcheke ak lòt metòd analiz, li pwouve ke segondè Na ak ba K nan selil wonn ak Ca segondè nan mitokondri yo akòz domaj nan manbràn selilè a pandan pwosesis separasyon selil la. Metòd la glas-frèt fixation de cellules Et tissus se dabitid pou adopte trempe Et fixation anvan, ak lè sa a sere yo nan likid nitwojèn. Trempe fixation trè enpòtan pou efè conservation. Selil vivan oswa tisi fre yo rich nan dlo. Lè trempe, pati nan selil yo oswa tisi ki an kontak dirèk ak febrifuj la kraze (espesyalman lè trempe ak nitwojèn likid) yo souvan jele ak fiks an premye, konsa fòme yon "koki", ki anpeche Pati santral selil yo te. kraze ak frèt-fiks. Se poutèt sa, lè w ap fè analiz X-liy mikwo zòn, li souvan jwenn ke gen kristal glas nan sant la nan pi gwo selil yo. Yo nan lòd yo anpeche sa rive, yon sibstans ki gen yon pwen k ap fonn ki pi wo pase sa ki nan nitwojèn likid men pi ba pase sa yo ki nan 806c yo itilize kòm yon febrifuj kase. Gen anpil sibstans sa yo, men pi fasil pou jwenn, pi bon mache a se pwopan konsantre (pwen bouyi - 42.120c, pwen k ap fonn - 187.10c, pwa molekilè 44.1), ak vitès refwadisman an se pi rapid la. . Men, dezavantaj li se ke li se ki ka pran dife.
Mikwoskòp byolojik ka mete fib nan misk sou yon etajè espesyal, se konsa ke lè kontraksyon nan fib nan misk rive nan yon sèten faz epi li bezwen yo dwe fiks, imedyatman kòmanse bouch la flite pwopan likid nan fib nan misk pou pasè ak ranje li. Lè sa a, fib nan misk yo ansanm ak ankadreman an yo te pran deyò epi yo mete nan nitwojèn likid. Si w ap fikse selil san yo oswa selil izole yo, premye konsantre selil yo pa santrifujasyon nan vitès ki ba, transfere selil yo nan yon flakon an ajan ki gen bon konduktiviti tèmik, mete flakon an nan pwopan likid, epi friz pou fikse. Lè ranje pankreyas rat la nan laboratwa Hall la, de blòk asye yo te pre-refwadi ak elyòm likid (oswa nitwojèn likid), epi de blòk kòb kwiv mete yo te sere ak forceps epi yo te mete sou devan ak dèyè pankreyas la pou pasè ak ranje. pankreyas la. Tisi oswa selil yo ka estoke nan nitwojèn likid pou depo alontèm apre asoupi ak fikse.
Mikwoskopi byolojik Anplis metòd seksyon ultramins ki pi respekte kounye a, isit la se yon lòt teknik depo syantis yo itilize. Yo ajoute yon sibstans ki fòme yon sediman ak eleman yo dwe analize a pou imobilize li anvan analiz, epi yo analize sediman an. Pou egzanp, moun souvan itilize oksalat ak pyroantimonate pou depoze ca nan selil misk yo. Ansyen an pa sansib ase nan konsantrasyon ki ba nan Ca nan sitoplasm la; pyroantimonate se pi sansib epi li ka fòme depo elektwon-dans ak Ca gratis nan sèvo a, men pyroantimonate pa konpatib ak sodyòm, Manganèz, baryòm, fè Depo yo tou fòme epi yo gen mwens espesifik. Pwosesis preparasyon echantiyon an se menm jan ak preparasyon espesimèn seksyon ultrathin mikwoskòp elèktron transmisyon òdinè, diferans lan se ke 3 pousan pyroantimonate potasyòm (salin tanpon fosfat, pH 7.6) te fiks pou 6 èdtan anvan fiksasyon, ak sou seksyon ultrathin nan misk tache, Depo nwa yo te wè nan liy mitan bann A ak 2 nan chak sarcomere, epi yo te itilize seksyon san tach pou mikwo-analiz radyografi. Tetrahydrochloride Diaminobenzidine (DAB) te itilize pou presipite sibstans ki gen heme ak sou sa. Konbinezon an nan reyaksyon presipitasyon istochimik ak radyografi mikwo-diferansasyon pon ka konsidere nan laboratwa ki pa gen kondisyon seksyon ultrathin jele. Semi-quantitative ka fè dapre wotè nan pik nan eleman yo dwe analize
