Mikwoskopi byolojik sou volim blòk tisi yo
Byomikwoskopi Jiska prezan, fiksasyon glas frèt, seksyon ultra-mens jele ak manipilasyon sèk jele se metòd woutin pou mikwo-ray radyografi tisi ak selil yo. Detay yo nan metòd la yo eksplike nan pwen sa yo:
Mikwoskòp byolojik Mikwoskòp ak yon lantiy kondansasyon ka deplase monte ak desann pou reyalize yon klète modere, oswa ouvèti a nan ekspansyon limyè varyab la ka chanje pou reyalize yon klète modere 9b. Si limyè a se solèy, ka tach la ka ogmante kòmsadwa, epi ouvèti a nan limyè a varyab ka elaji kòmsadwa. Si limyè a twò fò, lè sa a, Iwa dokiman Pwen Enpòtan an kapab apwopriye desann, Ouverture limyè varyab leap pou rediksyon apwopriye. Si nan ka sa a toujou santi avèg, Lè sa a, ou ka chwazi filtè ki apwopriye a mete nan bracket la anba dokiman Pwen Enpòtan an. Sa a ka jwenn fè ou satisfè ak klète a. Natirèlman, nan ajisteman nan pozisyon yo anwo ak pi ba nan lantiy la kondansateur ka varye gwosè a nan Ouverture a nan lekti a limyè ak seleksyon an nan filtè apwopriye, se sa ki apre yon sèten peryòd pratik ak eksperyans.
Mikwoskòp byolojik Yon pwoblèm trè enpòtan se nan pwosesis pou pran echantiyon ak separasyon selil yo, friz-seche ak rezin embedding (FD) apre konjelasyon ultra-ti liv, friz-seche apre yo fin kouri amann nan chak pati nan kontni an konpozisyon eleman 65 yo dwe. okipe ak anpil atansyon, epi yo pa dwe domaje selil yo dwe obsève ak analize. Paske analiz mikwo-ray radyografi a se pa sèlman yon anpil nan etap, ak pri a se trè wo, si apre yon tan long ak etap miltip nan pwosesis, selil yo analize yo se selil ki domaje oswa selil mouri, yo tire konklizyon yo mal. trè regrèt. Pou egzanp, kardyomyosit yo izole pa tretman an kolagenaz gen de mòfoloji, youn se long baton ki gen fòm ak lòt la se wonn. Lèt yo se selil mouri ki te domaje pandan izolasyon selil yo.
Byomikwoskopi Kontni ak distribisyon elektwolit nan de kalite selil sa yo diferan anpil. Na te trè wo ak K trè ba nan kadyomyosit wonn yo, ak konsantrasyon nan ca te trè wo nan mitokondri yo. Apre tcheke ak lòt metòd analyse, li te montre ke segondè Na ak ba K nan selil wonn yo ak segondè ca nan mitokondri yo te rezilta domaj nan manbràn selilè a pandan separasyon selil. Se fiksasyon frèt selil yo ak tisi yo souvan fè pa fixation pasè ki te swiv pa prezèvasyon nan nitwojèn likid. Fiksasyon pasè enpòtan pou efikasite prezèvasyon. Selil vivan oswa tisi fre yo rich nan dlo, lè trempe se souvan selil yo oswa tisi ak ajan an frèt (espesyalman ak nitwojèn likid pi frèt) kontak dirèk ak pati pyès sa yo nan premye friz-fiksasyon an, konsa fòme yon "koki", ki anpeche sant la nan selil la frèt fikse. Kòm yon rezilta, yo souvan jwenn kristal glas nan sant selil ki pi gwo pandan analiz mikroselilè radyografi. Yo nan lòd yo anpeche sa a rive, sibstans ki gen yon pwen k ap fonn ki pi wo pase nitwojèn likid men pi ba pase 806c sèk yo itilize kòm ajan refwadisman. Gen anpil sibstans sa yo, men * fasil jwenn, pa chè se pwopan konsantre (pwen bouyi nan 42.120c, pwen k ap fonn nan 187.10c, pwa molekilè nan 44.1), to a refwadisman * vit. Sepandan, li gen dezavantaj pou yo ka pran dife.
Ka mikwoskòp byolojik dwe mete sou yon etajè espesyal fib nan misk, se konsa ke kontraksyon nan fib nan misk yo rive nan yon sèten tan faz bezwen yo dwe fiks, imedyatman kòmanse bouch la, se konsa ke pwopan nan likid nan jè a fib nan misk, se konsa ke asouvisman nan frèt la fikse. Lè sa a, fib nan misk yo retire ansanm ak etajè a epi li mete nan nitwojèn likid. Si fikse selil san oswa selil izole, premye santrifujasyon ba-vitès fè selil yo konsantre, selil yo pral transfere nan yon bon konduktiviti tèmik nan tib an ajan, tib la nan kadav la pwopan likid frèt fiks. Hall laboratwa fiks rat pankreyas, de premye moso fe ak likid elyòm (oswa likid nitwojèn) pre-refwadisman, ak yon kranpon sere de moso kwiv yo pral mete devan ak dèyè pankreyas la, se konsa ke matant la nan la. glann trempe frèt fixation. Tisi oswa selil yo ka estoke nan nitwojèn likid pou yon tan long apre asouvisman ak fikse.
