Mikwoskòp byolojik konsènan volim blòk tisi yo
Mikwoskopi byolojik Jiska prezan, fiksasyon frèt, seksyon ultramins jele ak siye friz se metòd woutin pou mikwo-seksyon radyografi tisi ak selil yo. Sa ki annapre yo se detay sou metòd sa a:
Mikwoskòp byolojik. Pou mikwoskòp ki gen yon kondansasyon, oulwa a ka deplase monte ak desann pou reyalize klète modere. Anplis de sa, Ouverture varyab limyè emisyon dyod yo ka chanje pou reyalize modere 9b klète. Si limyè a klere, kondansasyon an ka monte kòmsadwa epi ouvèti limyè varyab la ka elaji kòmsadwa. Si limyè a twò fò, oulwa a ka bese yon fason ki apwopriye epi ouvèti a nan gwo bout bwa a kwa-limyè ka yon fason ki apwopriye redwi. Si ou toujou santi klere byen bèl anba sitiyasyon sa a, ou ka chwazi yon filtè ki apwopriye epi mete l sou bracket la anba kondansasyon an. Nan fason sa a ou ka jwenn klète ki satisfè ou. Natirèlman, li pran yon sèten peryòd pratik pou jwenn eksperyans nan ajiste pozisyon an monte ak desann nan kondansasyon an reyalize gwosè ouvèti varyab ak chwazi filtè ki apwopriye yo.
Yon pwoblèm trè enpòtan nan mikwoskospi byolojik se ke pandan pwosesis la nan kolekte ak separe selil yo, apre friz-seche ak résine embedding (FD), apre lè w konjele granules ultra-mens, epi apre friz-seche, kontni an 65 eleman nan chak pati dwe. dwe analize ak anpil atansyon, epi absoliman Pa domaje selil yo dwe analize. Paske analiz X-ray mikwo-zòn pa sèlman enplike anpil etap, men tou, koute anpil. Si apre yon tan long ak plizyè etap, selil yo analize yo se selil ki domaje oswa selil ki mouri, li ta yon pitye pou tire konklizyon mal. Pou egzanp, cardiomyocytes izole apre tretman kolagenaz gen de fòm, youn se long baton ki gen fòm ak lòt la se wonn. Lèt yo se selil mouri ki domaje pandan izolasyon selil yo.
Mikwoskopi byolojik Kontni ak distribisyon elektwolit nan de kalite selil sa yo diferan anpil. Na trè wo ak K trè ba nan kadyomyosit wonn, ak konsantrasyon Ca nan branch lineyè trè wo. Apre tcheke ak lòt metòd analiz, li te pwouve ke segondè Na ak ba K nan selil wonn ak segondè ca nan mitokondri yo te akòz domaj nan manbràn selilè a pandan pwosesis separasyon selil la. Metòd fiksasyon frèt selil yo ak tisi yo souvan se premye pasè ak ranje yo, ak Lè sa a, estoke yo nan nitwojèn likid. Trempe ak fikse yo trè enpòtan pou efè a prezèvasyon. Selil vivan oswa tisi fre yo rich nan dlo. Lè trempe, pati nan selil yo oswa tisi ki an kontak dirèk ak kriyojèn nan (sitou lè trempe ak nitwojèn likid) yo premye jele ak fiks, konsa fòme yon "koki", ki anpeche pati santral la nan selil yo te kraze. ak frèt-fiks. Se poutèt sa, lè w ap fè analiz mikwo zòn X-liy, li souvan jwenn ke gen kristal glas nan sant la nan pi gwo selil yo. Pou anpeche sa rive, yo itilize yon sibstans ki gen yon pwen k ap fonn ki pi wo pase nitwojèn likid men yon sechrès ki pi ba -806c kòm frigorigènes kraze a. Gen anpil sibstans sa yo, men youn nan pi fasil ak pi bon mache se pwopan konsantre (pwen bouyi - 42.120c, pwen k ap fonn - 187.10c, pwa molekilè 44.1), ak to a refwadisman se tou pi rapid la. Men, dezavantaj li se ke li se ki ka pran dife.
Mikwoskòp byolojik ka mete fib nan misk sou yon ankadreman espesyal. Lè kontraksyon nan fib nan misk rive nan yon sèten faz epi li bezwen yo dwe fiks, se bouch la kòmanse imedyatman flite pwopan likid nan fib nan misk yo pasè ak ranje li. Lè sa a, fib nan misk yo ansanm ak ankadreman an yo te pran deyò epi yo mete nan nitwojèn likid. Si selil san yo oswa selil ki separe yo fiks, premye santrifuje nan vitès ki ba pou konsantre selil yo, transfere selil yo nan yon ti tib an ajan ak bon konduktiviti tèmik, mete tib la nan pwopan likid epi friz pou ranje li. Lè w ap fikse pankreyas rat la nan laboratwa Hall la, premye refwadi de blòk asye yo ak elyòm likid (oswa nitwojèn likid), sere de blòk kòb kwiv mete yo ak forceps, epi mete yo anvan ak apre pankreyas la pou pasè epi ranje glann matris la. . Tisi oswa selil yo ka trempe ak fiks epi Lè sa a, transfere nan nitwojèn likid pou depo alontèm.
