Estrikti debaz nan mikwoskospi fliyoresan konfokal
(1) Modil eskanè
Modil optik la sitou konsiste de yon ba limyè pinhole (kontwole epesè tranch optik), yon espektroskop (chanje direksyon pwopagasyon limyè selon longèdonn), yon kolorimèt fluoresans emisyon (chwazi limyè nan yon seri longèdonn sèten pou deteksyon), ak yon detektè (tib fotomultiplikatè). Fliyoresans melanje nan echantiyon fliyoresan an antre nan eskanè a, epi apre yo fin chwazi pa deteksyon pinhole limyè ba a, espektromètr, ak kolorimètr, li divize an divès kalite fluoresans monokromatik, ki detekte nan chanèl fliyoresan diferan ak fòme imaj konfokal korespondan. An menm tan an, plizyè imaj paralèl fluoresans monokromatik ak imaj konpoze yo ka parèt sou ekran òdinatè a.
(2) Sistèm mikwoskopi fluoresans
Mikwoskòp se eleman prensipal LSCM, ki gen rapò ak bon jan kalite D nan sistèm nan. Chemen optik mikwoskòp la ka fasilman antre nan yon sistèm optik enfiniman byen lwen ak opsyon optik san yo pa afekte bon jan kalite D ak presizyon mezi. Objektif la ta dwe yon gwo ouvèti nimerik plat jaden objektif apokromatik, ki se benefisye pou akizisyon fluoresans ak D klè. Konvèsyon gwoup lantiy objektif la, seleksyon gwoup filtre koulè a, ajisteman mouvman etap la, ak bloke memwa avyon fokal la ta dwe otomatikman kontwole pa òdinatè a.
Mikwoskòp fliyoresan yo itilize nan mikwoskòp konfokal lazè optik se jeneralman menm jan ak yon mikwoskòp fliyoresan konvansyonèl, men li gen karakteristik pwòp li yo: li bezwen konekte ak yon eskanè, pou lazè a ka antre nan objektif mikwoskòp la iradyasyon echantiyon an epi fè. fliyoresans ki emèt pa echantiyon an rive nan detektè a; Yon aparèy konvèsyon chemen limyè obligatwa, ki konvèti lanp mèki an lazè, epi entansite limyè lanp mèki a ka ajiste.
(3) Lazè komen
Sous lazè yo itilize nan mikwoskopi konfokal optik lazè gen ladan yon sèl lazè ak sistèm lazè milti, ak lazè yo souvan itilize gen twa kalite sa yo:
Semiconductor lazè: 405nm (tou pre liy espèk iltravyolèt)
Agon ion lazè: 457nm, 477nm, 488nm, 514nm (ble limyè vèt)
He-Ne lazè: 543nm (limyè vèt He-Ne lazè vèt) 633nm (limyè wouj He-Ne lazè wouj)
UV lazè (UV lazè): 351 nm, 364 nm (limyè UV)
(4) Ekipman oksilyè
Sistèm refwadisman lè refwadi, dlo-refwadi ak ekipman pou pouvwa reglemante.
Prensip debaz k ap travay nan yon mikwoskòp konfokal optik lazè se premye emèt yon sèten longèdonn limyè eksitasyon soti nan lazè a. Apre anplifikasyon, limyè a pase nan ba limyè pinhole eklere nan eskanè a pou fòme yon sous limyè pwen. Lantiy objektif la konsantre sou plan fokal echantiyon an, ak pwen yo eklere ki koresponn sou echantiyon an eksite epi emèt fliyoresans. Apre yo fin pase nan ba limyè twou deteksyon an, li rive nan detektè a epi li imajine sou ekran siveyans òdinatè a. Nan fason sa a, se yon imaj konfokal konplè ki fòme pa imaj fluoresans nan chak pwen nan echantiyon an sou plan fokal la, ki rele yon tranch limyè.
