Aplikasyon Fluoresans Total Refleksyon Entèn Fluoresan Mikwoskopi
TIRFM (Total Refleksyon Entèn Fluoresans Mikwoskòp), mikwoskòp fluoresans refleksyon entèn total, lè limyè antre nan yon mwayen ki gen yon endèks refraktif pi ba soti nan yon mwayen ki gen yon endèks refraktif segondè, si ang ensidan an se gwo ase, tout limyè a reflete san refraksyon, men nan Koòdone nan de medya yo pwodui vag evanesan ki ka eksite fliyoresans nan 100nm tou pre koòdone a reyalize obsèvasyon sifas objè a. Limyè eksitasyon an ka voye nan limyè a nan yon mikwoskòp fluoresans konvansyonèl oswa yon limyè espesyal, epi yo ka kontwole ang ensidan an nan lazè a. Yo itilize metòd eksitasyon enstantane jaden an pou anpeche limyè eksitasyon an antre nan detektè a. Limyè a eksitasyon nan koòdone ki genyen ant vè ak dlo pwodui yon entèn konplè aplike pa refleksyon. Akòz atenuasyon eksponansyèl limyè eksitasyon an, se sèlman echantiyon zòn nan trè pre sifas refleksyon total la pral pwodwi refleksyon fliyoresan, ki diminye anpil entèferans bri limyè background nan sib obsèvasyon an, kidonk teknoloji sa a lajman itilize nan obsèvasyon dinamik. nan sibstans ki sou sifas selil yo.
Dyagram chema mikwoskopi fluoresans refleksyon entèn total (TIRFM)
① Egzanp ② Ranje vag evanesan ③ Kouvri vè ④ Imèsyon lwil oliv ⑤ Sib ⑥ Travès emisyon (siyal) ⑦ Travès eksitasyon
Yo nan lòd yo reyalize total refleksyon entèn, yon gwo ang ensidan obligatwa, pou egzanp, ang ensidan an nan koòdone vè-dlo a pi gran pase 61 degre. Sa a ka reyalize pa yon prism, ki rele prism ki baze sou TIRFM, oswa pa yon lantiy objektif ki gen yon gwo ouvèti nimerik, ki rele objektif-kalite TIRFM. Aktyèl komèsyalize total de refleksyon entèn fluoresans mikwoskòp yo jeneralman nan kalite lantiy objektif, ak gwo vitès ak gwo presizyon.
Mikwoskopi fluoresans total refleksyon entèn yo lajman itilize nan kèk jaden byolojik paske li ka reyalize obsèvasyon fluoresans nan yon seri trè mens (mwens pase 100nm) sou sifas objè yo. Tankou aplikasyon sa yo:
Obsèvasyon nan imaj sifas selil yo: estrikti sifas manbràn selilè, kontak sifas selil, dinamik sifas manbràn / lokalizasyon pwoteyin.
Obsèvasyon ak manipilasyon yon sèl molekil: myosin, aktin, ak Cy3-ATP ki make.
Mouvman sifas manbràn selilè: tankou anglouti vesikil, ekzalasyon vesik, ak exocrine vesik. la
Obsèvasyon fenomèn etensèl kalsyòm nan manbràn selilè, siveyans chanèl ion.
Rechèch motè molekilè: motè wotasyon, pwoteyin sitoskelèt, polymère, pwoteyin G, pwoteyin bag, motè nukleotid.
Anplis de sa nan jaden an nan byoloji, li tou gen bon aplikasyon nan jaden an nan chimi pou obsèvasyon nan estrikti chimik molekilè.
